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目的研究大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)与肝实质细胞(hepatocyte,HC)微载体贴附共培养时HSC对HC形态及功能的影响,为体外原代培养肝细胞的营养与支持提供参考。将微载体贴附共培养的肝细胞与HSC移植到D-GalN诱导的急性肝衰竭(acute liver failure, ALF)大鼠腹腔内,评估其对急性肝衰竭大鼠的疗效,为临床应用肝细胞移植及生物人工肝(bioartificial liver, BAL)提供理论依据。方法采用半原位酶分离法灌注分离获得SD大鼠肝细胞,并与大鼠肝星状细胞进行微载体贴附共培养,观察肝细胞的形态及功能改变,确定行肝细胞移植(heptacyte transplantation, HCT)的最佳时期。再将体外共培养的肝细胞与肝星状细胞移植入D-氨基半乳糖诱导形成的急性肝衰竭大鼠模型腹腔内,观察2周内大鼠的存活率,检测肝功能指标,并观察肝脏及腹膜组织学变化。结果每只鼠可分离获得(13.4±4.3)×107个肝细胞,肝细胞活力为89.2%±9.6%。体外培养的肝细胞形态特征及白蛋白、尿素合成等功能可保持7天以上。共培养第3天上清液中白蛋白及尿素浓度最高,LDH最低,与单独培养组比较,差异有显著性(P<0.05)。我们选用体外培养3天的肝细胞或HC/HSC进行HCT。移植2周内HCT组、HSC-HCT组大鼠存活率较ST组明显升高,尤其以HSC-HCT组升高显著,三组之间差异均有显著性(P<0.05)。移植后7天内,HCT组、HSC-HCT组大鼠肝功及凝血均有明显改善,与空载体组比较差异有显著性(P<0.05)。ST组在移植3天后,肝脏病理有继续恶化趋势,而HCT组、HSC-HCT组都有不同程度的恢复。腹膜组织HE染色证实移植入腹腔内的HC或HC/HSC在受体腹腔内存活一周左右。结论微载体培养肝细胞第3天有较好白蛋白及尿素合成功能,且LDH漏出量较低,适合行肝细胞移植。HSC与HC共培养,能更好地发挥肝细胞生物学功能。腹腔内移植微载体贴附培养HC或HC/HSC,都可以对急性肝衰竭大鼠提供代谢支持,可显著改善肝功能、减轻肝脏病理改变,提高急性肝衰竭大鼠的存活率,尤以腹腔内移植微载体贴附HC与HSC效果更佳。