论文部分内容阅读
组蛋白去甲基化酶FBXL10(F-box and leucine-rich repeat protein 10)是最大的组蛋白去甲基化酶亚家族JmjC蛋白家族的成员之一,编码它的基因定位于12q24.31,具有特异性的H3K4me3和H3K36me2/1去甲基化酶活性。FBXL10又名JHDM1B(Jmjc domian-containing histone demethylase 1B)、KDM2B(lysine (K)-specific demethylase 2B)、Ndy-1(Not dead yet-1),FBXL10蛋白具有JmjC去甲基化酶活性结构域, CXXC DNA结合结构域, PHD植物同源结构域, proline-rich脯氨酸富集结构域, F-box结构域和leucine-rich repeat结构域。关于FBXL10在癌症方面的功能研究颇有争议,根据细胞背景的不同,可分为抑癌和致癌两方面,已有报道FBXL10在人类淋巴瘤和乳腺癌中有高表达。转录因子FOXC1是Forkhead box(Fox)家族中的亚家族FOXC的成员之一, FOXC1蛋白含有转录调节区、DNA结合区和一些其他的结构。我们的实验发现FBXL10与FOXC1在两种转移能力不同的乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中的表达水平呈现明显负相关,进一步分别过表达和干涉实验证实FBXL10能够调控FOXC1基因的转录。本实验室此前的研究表明,FOXC1在乳腺癌细胞系中的外源表达能够抑制乳腺癌细胞的增殖,PcG家族蛋白EZH2能够通过影响FOXC1基因启动子处组蛋白乙酰化和H3K27的三甲基化来抑制FOXC1,而组蛋白去甲基化酶FBXL10在乳腺癌中的功能以及此功能的实现是否与FOXC1有关仍未见报道。本论文旨在研究组蛋白去甲基化酶FBXL10对乳腺癌细胞增殖的影响及其功能的实现是否通过FOXC1起作用。MTT结果显示,外源过表达去甲基化酶FBXL10能明显促进乳腺癌细胞MCF7的增殖。荧光素酶报告基因、反转录PCR(RT-PCR)和western bloting结果表明,FBXL10可明显抑制FOXC1的表达水平。本项研究初步探讨了FBXL10在乳腺癌增殖方面的功能,确定了FOXC1为FBXL10又一个全新的靶基因,为深入研究FBXL10基因的功能及其转录调控机制奠定了基础,同时也为进一步揭示FBXL10的生物学功能提供了线索。