【摘 要】
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目的近年来研究表明上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的发生发展中扮演者重要角色,与肝癌细胞的侵袭和转移有密切相关。近期研究表明,干扰视黄酸相关孤儿核受体-γ（retinoid-related orphan receptor-γ,ROR-γ）通过下调Smad2抑制EMT,进
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目的近年来研究表明上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的发生发展中扮演者重要角色,与肝癌细胞的侵袭和转移有密切相关。近期研究表明,干扰视黄酸相关孤儿核受体-γ（retinoid-related orphan receptor-γ,ROR-γ）通过下调Smad2抑制EMT,进而调节肝纤维化的进行。但ROR-γ是否通过调控Smad2影响肝癌细胞EMT以及ROR-γ蛋白表达与肝癌患者临床病理特征相关性研究鲜见报道。本研究检测ROR-γ蛋白在肝癌组织中表达并分析与患者临床病理特征间的相关性,探讨ROR-γ在肝癌发生、发展和转移过程中的作用以及干扰ROR-γ对肝癌细胞中Smad2、EMT标志物E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平的影响。方法选取90例肝癌组织及56例癌旁正常组织石蜡标本、20例肝癌组织及癌旁新鲜术后组织。采用免疫组织化学法和Western blotting法检测ROR-γ在肝癌及癌旁正常组织中的表达。Western blotting法检测肝癌及癌旁正常组织中ROR-γ、Smad2、以及EMT标志物E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。将ROR-γ-si RNA干扰处理Hep G2或Hu H7细胞后,用Western blotting法检测ROR-γ、Smad2、以及EMT标志物E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。将ROR-γ-si RNA转染至Hep G2细胞,通过Transwell小室实验观察肝癌Hep G2细胞的侵袭能力。结果免疫组织化学染色和Western blotting结果显示,肝癌组织中的ROR-γ蛋白阳性表达率比癌旁组织显著升高（P＜0.05）,且ROR-γ蛋白表达与肝癌患者肿瘤数目、Edmondson分级、TNM分期和门静脉浸润有关联（P＜0.05）。与癌旁组织相比,肝癌组织中ROR-γ、Vimentin和Smad2磷酸化水平显著升高（P＜0.05）,E-cadherin的表达水平显著降低（P＜0.05）。Hep G2或Hu H7细胞中干扰ROR-γ后,与对照组相比较,E-cadherin的表达水平显著升高（P＜0.05）,Vimentin、ROR-γ蛋白和Smad2磷酸化水平显著降低（P＜0.05）。与对照组比较,ROR-γ-si RNA组侵袭细胞数量明显变少（P＜0.05）。结论ROR-γ蛋白表达与肝癌患者病理特征有密切相关,而且干扰ROR-γ可下调p-Smad2的表达,进而抑制人肝癌细胞的EMT。
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