乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染是严重的全球公共健康问题之一,人体肝脏长期被HBV侵袭会导致不同程度的肝纤维化、肝硬化,甚至发展成肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)。临床常用的抗病毒治疗药物包括干扰素和核苷/核苷酸类似物。IFN-γ属于Ⅱ型干扰素,除了能发挥抗病毒功能外,还有抗肿瘤、调节机体免疫反应和维持机体自身稳定等多重功能。与IFN-α相比,IFN-γ还有较好的抗纤维化作用,能更好地预防肝细胞的恶性发展,但IFN-γ的抗病毒机制迄今尚未十分明确。通过文献调查和前期预实验,我们发现IFN-γ能引起细胞中半乳糖凝集素-3结合蛋白(Galectin-3-binding protein,LGALS3BP)表达量的增高。LGALS3BP是一种在人体内普遍存在且功能多样的分泌型糖蛋白,在人血清和其他生物体液中均能被检测出来。有文章报道LGALS3BP与机体的免疫功能有紧密联系,且能对抗多种病毒的感染。而IFN-γ抗HBV的分子机制尚不清楚,本研究提出科学假设,LGALS3BP能否作为辅助因子参与IFN-γ介导的抗HBV作用。本研究以瞬时转染1.1×HBV质粒(p CH9-3091)的Hep G2和包含HBV基因组的Hep G2.215二种细胞系为模型,首先,发现IFN-γ刺激后能引起Hep G2中LGALS3BP内源性表达量增加,接着,在这二种细胞系中证明了IFN-γ具有直接的抗HBV作用。随后成功构建了LGALS3BP基因的过表达质粒pc DNA3.1-LGALS3BP和干扰质粒p SUPER-sh-LG,通过瞬时转染进入细胞,实现了对细胞中LGALS3BP基因表达水平的正反向调节。最后,我们在对细胞中LGALS3BP过表达或敲低的基础上,用40ng/ml浓度的IFN-γ处理两种细胞,用ELISA方法检测感染病毒的细胞分泌到培养液中HBV HBe Ag和HBs Ag的水平,采用q PCR的方法检测细胞内病毒核衣壳中新生的HBV DNA的复制水平,采用q RT-PCR的方法检测细胞内HBV m RNAs转录水平。实验结果表明40ng/ml的IFN-γ对细胞没有毒性,能下调细胞内病毒核衣壳中HBV DNA和细胞内HBV m RNAs水平,抑制细胞分泌至培养液中HBV HBs Ag的水平,但对HBe Ag分泌水平影响不明显。总之,在LGALS3BP过表达的情况下,IFN-γ对HBV的抑制作用增强。反之,当LGALS3BP的表达量被敲低时,IFN-γ对HBV的抑制作用被削弱。因此,我们得到结论,LGALS3BP作为正向调节因子参与IFN-γ介导的抗HBV过程。