铁补充对雄性大鼠淋巴细胞和生殖系统氧化损伤影响的研究

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目的铁摄入过量可诱导机体氧化应激,造成细胞氧化和组织器官损伤,本文旨在观察不同剂量铁对雄性大鼠淋巴细胞及生殖系统的影响。方法SPF级6~7周龄雄性Wistar大鼠40只,按体重随机分为4组,每组10只,即对照组、低剂量铁组、中剂量铁组、高剂量铁组,隔日腹腔注射右旋糖酐铁,含铁量分别为0.9 mg、0.3 mg、9 mg、18 mg,连续干预12周。4组大鼠自由饮用去离子水,喂饲无铁饲料,于第12周末眼眶取血,测定血清铁浓度,采用“彗星”电泳法及损伤等级法(AU)分析和评价大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤状况;处死大鼠,留取雄性生殖器官,计算精子数量、精子运动率、精子畸形率,并检测睾丸组织中铁含量及GSH-Px、SOD、CAT、MDA水平。结果经过12周补铁干预后,低剂量铁组大鼠血清铁含量为53.54μmol/L明显低于对照组的74.94μmol/L(P<0.001),而中剂量和高剂量铁组大鼠血清铁含量分别为104.77μmol/L和205.12μmol/L,显著高于对照组(P值均<0.001)。外周血淋巴细胞DNA损伤分析结果显示,大鼠淋巴细胞DNA本底损伤均较低,低剂量铁组和对照组大鼠淋巴细胞DNA损伤分别为25.30 AU和21.13 AU,两组间无统计学差异(P>0.05),但中剂量和高剂量铁组大鼠DNA本底损伤分别达到了82.80 AU和169.50 AU,显著高于对照组(P值均<0.001);体外小剂量强氧化剂(H2O2)处理大鼠外周血淋巴细胞后观察H2O2对DNA氧化损伤的影响,结果显示对照组和低剂量铁组大鼠淋巴细胞DNA损伤分别为259.00 AU和260.40 AU,两组间无统计学差异(P>0.05),而中剂量和高剂量铁组大鼠淋巴细胞DNA损伤水平较对照组分别达到了293.80 AU和308.88 AU,显高与对照组(P值均<0.001)。铁对雄性大鼠精子数量和质量影响分析显示,对照组大鼠精子数量为4.1×108/ml,低、中和高剂量铁组的精子数量分别为3.8×108/ml、3.1×108/ml、1.9×108/ml,其中高剂量铁组显著低于对照组(P<0.001);精子活动率结果显示,对照组大鼠精子活动率为77.0%,中剂量和高剂量铁组分别为49.8%和26.6%,显著低于对照组(P值均<0.001);精子畸形率结果显示,对照组大鼠精子畸形率为7.2%,高剂量铁组为11.8%,显著高于对照组(P<0.001)。睾丸组织铁含量结果显示,对照组和低剂量铁组大鼠睾丸组织铁含量分别为16.02μmol/gprot和9.97μmol/gprot,两组间无统计学差异(P>0.05),而中剂量和高剂量铁组大鼠睾丸组织铁含量分别达到33.45μmol/gprot和75.39μmol/gprot,显著高于对照组(P值均<0.001)。氧化应激水平检测结果显示,高剂量铁组大鼠睾丸组织中SOD和CAT活性为170.84 U/mgprot和1.38 U/mgprot,显著低于对照组(P值均<0.05);中剂量和高剂量铁组大鼠睾丸组织中GSH-Px分别为143.11酶活力单位和123.26酶活力单位,显著低于对照组(P值均<0.05);中剂量和高剂量铁组大鼠睾丸组织中MDA水平分别为6.16 nmol/ml和7.88nmol/ml,显著高于对照组(P值均<0.001)。结论腹腔注射中剂量的铁可增加机体铁负荷水平,诱发机体淋巴细胞DNA本底损伤和氧化损伤。腹腔注射高剂量的铁可损伤雄性大鼠生殖功能,包括精子数量减少、精子运动率降低以及精子畸形率升高。因此,机体铁过载有害健康,应防止过量补充。
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