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第一部分VEGF-B对STZ诱导的BN大鼠视网膜神经节细胞凋亡的保护作用的研究目的：研究VEGF-B在糖尿病视网膜病中的神经保护作用。方法：建立STZ诱导的BN大鼠糖尿病模型,实验分3组：1.空白对照组,正常大鼠；2.实验对照组：糖尿病大鼠,玻璃体内注射BSA每只眼睛注射VEGF-B蛋白500ng,每5天注射一次,共注射3次；3.实验组：糖尿病大鼠玻璃体腔内注射VEGF-B蛋白,每只眼睛注射VEGF-B蛋白500ng,每5天注射一次,共注射3次。最后一次注射5天后,颈椎脱臼处死大鼠,迅速取眼球后进行冰冻切片,TUNEL、DAPI染色,激光共聚焦显微镜拍照,计数凋亡细胞个数。结论：外源性的给予适量的VEGF-B蛋白可以抑制STZ诱导的糖尿病所导致的神经节细胞凋亡。第二部分高糖对RPE、HREC中VEGF-B及其受体表达、细胞内信号通路的影响目的：研究高糖状态下RPE、HREC中VEGF-B及其受体,Akt、Erk、 Src的表达,探索高糖对细胞信号通路的影响。方法：建立细胞培养高糖模型(培养基葡萄糖终浓度40mmol/L)。实验组RPE、HREC在高糖培养基培养6小时,24小时和48小时；对照组RPE、HREC在正常培养基培养6小时,24小时和48小时；收集上清,RIPA细胞裂解液裂解细胞后,提取细胞内蛋白,Western Blot检测细胞内VEGF-B以及细胞分泌的VEGF-B的表达,以及VEGFR-1、NP-1及Src、Erk、Akt的表达。结论：1.高糖诱导细胞内及上清中VEGF-B表达,细胞内VEGFR-1、NP-1表达增加。2.高糖诱导细胞内Akt、 Erk表达增加。3.高糖对细胞内Src表达无影响。VEGF-B与受体结合后,激活下游信号通路分子,Akt和Erk,从而来发挥其神经保护作用。