高血压肾病系原发性高血压引起的良性小动脉肾硬化(高血压肾小动脉硬化)和恶性小动脉肾硬化,并伴有相应临床表现的疾病。为高血压主要并发症之一,发生率为42%,仅次于心脏并发症,危害巨大。目前治疗高血压肾病的化学药物长期使用易导致不良反应和耐受性,且禁忌症多,具有一定局限性。复方一把针方为江苏省名中医唐蜀华教授的经验方,由酒萸肉、制何首乌、鬼针草组成,对高血压肾病有很好的治疗作用。本课题对复方一把针有效部位的筛选、提取、分离纯化、质量标准进行了研究,为该复方有效部位制剂的研制开发奠定了基础。主要研究内容包括：1.有效部位的确定通过文献及药效研究确定了酒萸肉、制何首乌、鬼针草治疗高血压肾病的有效部位,主要为环烯醚萜苷、二苯乙烯苷、总黄酮类成分。2.复方一把针中各饮片含量测定研究(1)分别建立了马钱苷和莫诺苷、二苯乙烯苷、总黄酮含量测定方法。(2)对方中各饮片有效成分的含量进行了测定,暂定酒萸肉、制何首乌、鬼针草饮片中马钱苷、莫诺苷、二苯乙烯苷、总黄酮含量范围分别为0.50%-0.90%、0.90%-1.60%、0.90%-2.00%、2.50%-4.50%。3.有效部位制备工艺研究(1)以马钱苷和莫诺苷转移率(含量)为指标,对酒萸肉中环烯醚萜苷的提取、分离纯化、干燥工艺进行了研究,确定了酒萸肉环烯醚萜苷有效部位制备工艺条件：酒萸肉饮片加10倍量水,煎煮3次,每次80 min,提取液浓缩至相对密度为1.20(60℃测定),放冷至室温,边搅拌边缓缓加入95%乙醇至含醇量达60%,静置过夜,滤过,滤液回收乙醇至无醇味后加水稀释至0.5g/mL,按树脂与生药量重量比为1：0.75加入上样液,2 BV/h的速度上D101大孔树脂柱,上样后水洗脱5 BV,再用15%乙醇溶液洗脱9 BV,回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05-1.15(60℃测定),60℃真空干燥。(2)以二苯乙烯苷转移率为指标,对制何首乌中二苯乙烯苷的提取、纯化工艺进行了研究,确定了二苯乙烯苷有效部位的制备工艺条件：制何首乌饮片加8倍量水,煎煮3次,每次75 min,提取液合并后80℃减压浓缩至相对密度为1.10(60℃测定),加1倍提取液体积的乙酸乙酯萃取4次。(3)以总黄酮含量为指标,对鬼针草总黄酮的提取、纯化工艺进行了研究,确定了鬼针草总黄酮有效部位制备工艺条件：鬼针草饮片加13倍70%醇提取3次,每次1 h,滤液合并,回收乙醇至无醇味,得鬼针草提取液,提取液稀释至0.5 g/mL,按树脂与药材重量比为1：0.5、3 BV/h的速度上D101大孔树脂柱,上样后水洗脱6 BV,再用50%乙醇溶液洗脱9 BV,回收乙醇后80℃真空干燥。(4)对各有效部位的制备分别进行了中试研究,结果表明,所筛选的工艺稳定可行,可用于工业生产。4.有效部位质量标准研究(1)采用薄层色谱法,分别建立了酒萸肉环烯醚萜苷、制何首乌二苯乙烯苷、鬼针草总黄酮有效部位及鬼针草饮片薄层鉴别方法。(2)采用高效液相色谱法,测定了酒萸肉环烯醚萜苷有效部位中马钱苷、莫诺苷含量,暂定马钱苷、莫诺苷总量不得少于50.0%；测定了制何首乌二苯乙烯苷有效部位中二苯乙烯苷含量,暂定二苯乙烯苷含量不得少于55.O%；采用比色法测定了总黄酮有效部位中总黄酮含量,暂定总黄酮有效部位中总黄酮含量以芦丁计不得少于50.0%。(3)对各有效部位的水分、炽灼残渣、重金属含量及二苯乙烯苷有效部位的乙酸乙酯残留进行了研究,并制定了相应的含量限度。