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目的:随着外科肾移植手术技术的发展和各种新型免疫抑制药物的开发应用,临床肾移植已经逐渐被人们接受,并得以广泛开展,成为治疗终末期肾病的有效方法。但同种异体移植术后发生的排斥反应,特别是急性排斥反应是制约当前临床。肾移植,乃至整个器官移植发展的主要因素之一。随着人类在分子生物学领域研究的进展以及在基因技术方面的进一步突破,人们认识到MHC基因表达与免疫排斥反应的关系密切,特别是对能引起急性排斥反应的MIIC-II类分子的研究成为近20年来的热点。在诱发免疫排斥反应的几个环节中,T细胞活化是启动同种排斥反应的始动环节,T细胞表面的T细胞受体(T cell receptor,TCR)与移植物表面供体特异性主要组织相容性复合体(major histocomptibilitycompletment,MHC)分子及其提呈抗原之间相互作用所表达的第一信号和共刺激通路激活后所表达的第二信号的双重参与是T细胞活化并最终导致特异性免疫反应的必要条件。MHC分子表达于所有人类细胞表面,在特定的条件下能引起强而迅速的排斥反应,通常称为人类白细胞抗原(Human.leukocvte antigen,HLA)。本研究拟探讨MHC-Ⅱ类分子在临床肾移植中的表达规律,了解其与急性排斥反应的关系。
方法:本研究为一项对照试验,自2004年9月至2005年12月期间,对于在中南大学湘雅医学院第三附属医院卫生部器官移植研究院进行肾移植的53例患者,根据自愿原则行移植肾活检。其中男性45例,女性8例。年龄13-62岁,平均43±5岁。术后常规免疫抑制方案为环孢素A、晓悉和强的松,所有病人均随访满6个月以上。肾活检组织用10%中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋,连续切片。用免疫组化技术检测肾组织内HLA-Ⅱ的表达。活检时间:术中(供肾修整结束时)、术后7天、1月、6月、1年或1年以上,当患者出现肾功能异常随时进行移植肾活检。
结果:①肾活检结果:53例肾移植受体共行肾活检198次。其中供肾修整结束时取活检53例次;术后。肾功能正常时(稳定期)定期穿刺活检81例次;肾功能异常时肾活检64例次,包括急性排斥反应(acute rejection,AR)28例次,抗AR治疗后9例次,非急性排斥反应(N-AR)27例次(输尿管并发症6例、慢性排斥反应14例、药物性。肾损伤7例次)。②HLA-Ⅱ抗原表达:HLA-Ⅱ在所有活检的肾组织上皮细胞上表达阳性,与移植前比较,肾功能稳定期的标本中,术后7天肾小管上皮细胞阳性率显著增加,其后逐渐下降,半年后转阴性;与移植前比较,AR时HLA-Ⅱ抗原在肾小管上皮细胞、血管内皮细胞、上皮细胞和炎性细胞上的表达均显著增加,其中炎性细胞全部呈阳性表达,系膜细胞阳性率为25%,肾小管上皮细胞阳性率为75%,血管内皮细胞阳性率为82%;抗排斥治疗7天后HLA-Ⅱ抗原的表达下降至术前水平,其中系膜细胞无一例阳性,肾小管上皮细胞阳性率下降为11%,血管内皮细胞阳性率为22%;移植后N-AR组系膜细胞染色阳性仅为3.7%,肾小管上皮阳性率为14.8%,血管内皮细胞阳性率为44%,所以AR组在肾小管上皮细胞、血管内皮细胞和上皮细胞上HLA-Ⅱ的表达也具有显著差异(p<0.05)。
结论:①移植肾组织内HLA-Ⅱ类分子表达与排斥反应密切相关,提示该分子在肾移植排斥反应的病理损害过程中起重要作用。②AR时移植肾组织内大量淋巴细胞浸润,并且炎性细胞以及排斥反应的靶细胞如肾小管上皮细胞、血管内皮细胞上HLA-Ⅱ类分子强表达。③HLA-Ⅱ类分子表达是动态变化的。移植物表面HLA-Ⅱ类分子的表达变化可影响其免疫原性的反应原性。④用免疫组织化学技术测定移植肾内HLA-Ⅱ类分子的表达可作为对肾移植常规病理诊断的有益补充,同时对AR诊断也有一定价值。