【摘 要】
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本文选取工业上较为常用、价格低廉的硅藻土和海藻酸钙为载体分别用吸附法和包埋法共固定化α-淀粉酶和糖化酶双酶体系。其方法简单,操作简便,成本低廉,更适合工业化大生产。
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本文选取工业上较为常用、价格低廉的硅藻土和海藻酸钙为载体分别用吸附法和包埋法共固定化α-淀粉酶和糖化酶双酶体系。其方法简单,操作简便,成本低廉,更适合工业化大生产。 本文研究了双酶比例和固定化条件对两种共固定化酶反应速率的影响。得到硅藻土共固定化双酶体系的最佳共固定化条件为:载体(g)∶糖化酶(U)∶α-淀粉酶(U)=1∶100∶160;温度为5℃-15℃;pH为4.5-5.5。海藻酸钙共固定化双酶体系的最佳共固定化条件为:海藻酸钠浓度为3%-4%,CaCl2浓度为2%;酶浓度为糖化酶20U/ml,α-淀粉酶24U/ml;糖化酶(U)∶α-淀粉酶(U)=1∶1.2;温度为50℃-70℃;pH为4.0-5.5。并比较了两种共固定化酶的热稳定性、pH稳定性、储藏稳定性和操作稳定性,得出两种共固定化酶的最适反应温度分别为50℃-60℃(硅藻土)和55℃-65℃(海藻酸钙);最适反应pH均为5.0;其米氏常数Km为16.830mg/ml(硅藻土)和10.467mg/ml(海藻酸钙)。 而共固定化酶的动力学研究以硅藻土共固定化酶为研究对象,是建立在游离双酶协同水解淀粉动力学和固定化酶在受产物抑制时的动力学基础上,并提出了共固定化酶的动力学模型:协同作用阶段α-淀粉酶的水解作用存在外扩散阻力和内扩散阻力,而糖化酶仅受到内扩散阻力;协同作用结束后糖化酶的水解反应同时受到外扩散阻力和内
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