目的:本研究通过动物实验及细胞培养，采用免疫组织化学法、CCK-8法及ELISA法等，检测Lewis肺癌荷瘤小鼠抑瘤率，脾脏指数，脾脏中T淋巴细胞CD4+、CD8+的表达，Lewis肺癌细胞的增殖率，外周血中IFN-γ、TNF–β、IL-10的含量，探讨山仙颗粒对Lewis肺癌细胞增殖及其荷瘤小鼠抗肿瘤免疫与免疫微环境的影响。以深入研究山仙颗粒提高机体抗肿瘤免疫的分子机制，为其临床应用进一步提供理论依据。　　方法:　　1.制备Lewis肺癌细胞悬液：将Lewis肺癌细胞体外培养扩增，取对数生长期的肿瘤细胞，经胰酶消化后，离心去上清，然后加10%胎牛血清、Hyclone DMEM高糖培养液，进行细胞计数，调整为1×108个／ml的瘤细胞混悬液。　　2.小鼠荷瘤模型的建立及分组：选取健康Balb/c小鼠48只，雌雄各半，4-5周龄，体重18～22g，适应性饲养一周后，编号，按体重指数随机、雌雄各半，选取12只，为空白组，于小鼠右前肢腋窝皮下注射0.4 ml生理盐水。其余36只进行造模，将制备的Lewis肺癌细胞悬液0.2ml（约2×107个瘤细胞）接种于小鼠右前肢腋窝皮下，三天后检查成瘤情况并测量，待肿瘤直径约为5mm时(约第5天)，然后按肿瘤大小指数、雌雄各半平均分为三组，每组12只，分别为模型组、化疗组、山仙颗粒组。　　3.药液制备：根据人、鼠体重计量换算法计算，将山仙颗粒用生理盐水配置成山仙颗粒混悬液。配置比例为：山仙颗粒(g):生理盐水(mL)=1:20，即0.05g/ml的混悬液,置于4℃冰箱中贮存备用。　　4.用药：分组完成后第二天开始用药，空白组、模型组及化疗组均予以生理盐水0.4mL，山仙颗粒组予以山仙颗粒混悬液0.4ml（1g/kg/d）灌胃，每天上午9点及下午3点各一次，连续21天；用药第1、3、5天，空白组、模型组及山仙颗粒组，予以生理盐水1mL腹腔注射，化疗组，予以顺铂（DDP）生理盐水溶液1mL（含DDP0.1mg）腹腔注射。　　5.样品采集：各组小鼠于末次灌胃24小时后称量体重、记录，用2%的水合氯醛将小鼠麻醉，75%酒精消毒置超净工作台，腹主动脉穿刺取血，立即离心取血清冻存于-80℃冰箱备用，剥离瘤组织、游离出脾脏并称重记录。每组每只小鼠预留1/3的脾脏组织，分离出出T细胞，备用，2/3脾脏福尔马林固定，备用。　　6.指标检测：计算抑瘤率及小鼠脾脏指数；免疫组化染色观察脾脏组织中淋巴CD4+、CD8+的表达情况；采用CCK-8法检测淋巴细胞对Lewis肺癌细胞增殖的影响，采用ELISA法检测外周血中IFN-γ、TNF-β与IL-10的变化。　　结果:　　1.对Lewis肺癌的抑瘤率：山仙颗粒组为45.99%，化疗组为20.02%，山仙颗粒组明显高于化疗组，且结果具有统计学意义。　　2.小鼠脾脏指数：模型组明显低于空白组，化疗组明显低于模型组，山仙颗粒组明显高于模型组，山仙颗粒组显著高于化疗组。　　3.免疫组织化学法检测小鼠脾脏组织中T细胞CD4、CD8的表达：模型组显著低于空白组，化疗组明显低于模型组，山仙颗粒组显著高于模型组，仙颗粒组显著高于化疗组；统计分析CD4+/CD8+比值结果表明，模型组CD4+/CD8+比值明显低于空白组，化疗组明显低于模型组，山仙颗粒组显著高于模型组，山仙颗粒组明显高于化疗组。　　4．CCK-8法检测小鼠淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的抑制率：淋巴细胞可抑制Lewis肺癌细胞的增殖，并与淋巴细胞浓度和作用时间呈正相关；且模型组显著低于空白组，化疗组明显低于模型组，山仙颗粒组明显高于模型组，山仙颗粒组明显高于化疗组。　　5.ELISA法检测外周血中的IFN-γ、TNF-β与IL-10：模型组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β显著低于空白组，化疗组明显低于模型组，山仙颗粒组显著高于模型组，山仙颗粒组显著高于化疗组；模型组小鼠外周血中的IL-10明显高于空白组，化疗组明显高于模型组，山仙颗粒组明显低于模型组，山仙颗粒组显著低于与化疗组。　　结论:　　1.山仙颗粒能明显抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的生长。　　2.山仙颗粒具有提高小鼠脾脏指数，增强T淋巴细胞活性；上调外周血中的IFN-γ、TNF-β而下调IL-10，表明山仙颗粒抗肿瘤机制可能与其提高机体免疫力、抑制肿瘤细胞免疫逃逸及肿瘤细胞增殖有关。　　3.依据本研究，山仙颗粒与顺铂相比，二者均可抑制Lewis肺癌细胞的增殖，但山仙颗粒有提高机体免疫力、抑制肿瘤细胞免疫逃逸的优势。