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本研究主要探讨磷酸二酯酶(PDE)抑制剂对牛和和水牛卵母细胞体外成熟的影响,以便建立一套提高卵母细胞体外成熟质量的成熟培养体系。 在成熟培养液中添加0.1mmol/L的Milrinone(一种PDE的抑制剂),成熟培养24h的牛卵母细胞孤雌激活分裂率低于对照组(30.9% vs 40.0%,P<0.05),但体外受精的分裂率与对照组无显著差异(68.1% vs 78.1%,P<0.05);当成熟培养时间延长到28h时,牛卵母细胞的孤雌激活分裂率(54.7% vs 61.5%)和受精分裂率(65.5% vs 75.0%)与对照组无显著差异(P>0.05);当成熟培养时间延长到32h时,牛卵母细胞的孤雌激活分裂率(52.9% vs 56.2%)无显著差异,但受精分裂率(54.2% vs 39.7%,P<0.05)显著高于对照组。在水牛卵母细胞的成熟培养液中添加0.1mmol/L的Milrinone,成熟培养24h,28h和32h的孤雌激活分裂率(12.9% vs38.0%,10.3% vs 43.1%,21.2% vs 44.1%)均显著低于对照组,24h和28h的受精分裂率(17.5% vs 40.6%,13.1% vs 44.3%)显著低于对照组(P<0.05),但32h的受精分裂率(11.8% vs 15.1%)与对照组无显著差异。水牛卵母细胞在含0.1mmol/L Milrinone的成熟液中培养24h后,再在不含Milrinone的成熟液中培养22h,其激活分裂率(57.7%)显著高于不培养(16.5%)和再培养10h(15.3%)的卵母细胞,囊胚发育率(41.0%)显著高于再培养10h(19.0%)的卵母细胞,分裂率和囊胚发育率均与正常成熟培养的对照组(57.8%和44.9%)相近。 以上实验结果表明,Milrinone对牛卵母细胞的成熟具有一定延迟作用,但对水牛卵母细胞的成熟具有明显的可逆抑制作用,经成熟抑制后的水牛卵母细胞恢复成熟后仍可保持较高的发育潜能。