多器官衰竭（MOF）造成的死亡占外科ICU总死亡率的50-80％。目前致病机理仍不很清楚，治疗方法仍很贫乏。许多研究提示：肿瘤坏死因子（TNF）可能在MODS的发生发展过程起重要作用，而TNF是在接触肿瘤坏死因子受体（TNFR）后发挥生物学效应，因此TNFR的研究也越来越引起人们的注意。但尚未见在动物模型上将TNF-sTNFR-TNFR系统进行研究的报道。本研究成功建立了大鼠MODS模型，并在此基础上，对sTNFR：Fc对TNF和TNFR的影响作了深入系统的研究，阐述了sTNFR:Fc防治MODS的作用和机理。 第一部分利用首次打击（失血性休克、复苏再灌注）和二次打击（内毒素）复合因素成功建立大鼠MODS模型。方法：36只SD大鼠随机分为失血性休克+复苏再灌注+内毒素组（组A，n＝16），失血性休克+复苏再灌注组（组B，n＝10），给予内毒素组（组C，n＝10）。通过给大鼠动脉放血致平均动脉压35-40mmHg，维持1h，然后回输60％血液和两倍平衡液复苏，12h后给内毒素（马流产杆菌内毒素）4.5mg/kg静脉滴入。结果：72h后其主要器官均发生功能不全和相应的病理状态改变。各器官衰竭率：肝为100％，肾90％，胃肠道60％，肺40％。MOF发生率达100％，死亡率达50％。结论：利用二次打击方法，可以成功复制出动物MODS模型，且模型MOF发生率高、死亡率高、重复性好、简单易行，致伤因素、发病过程、临床特征及诊断标准与临床典型的双相迟发MODS相似。 第二部分利用sTNFRp75：Fc，观察对模型动物的保护作用。方法：分为模型组和给药组（n＝16）。两组均用二次打击复制MOF模型。给药组大鼠复苏时先给予sTNFRp75：PcO.4mg/Kg，其余方法同第一部分。TNFα生物学活性以1929细胞为靶细胞，TNFα血中浓度用ELISA法检测。结果：与模型动物相比结果：1、MODS动物血中的TNFα生物学活性在休克、再灌注打击后上升较高水平，12h时下降至低水平，内毒素打击后再次明显升高，与浓度变化大致相仿，TNFα水平与MOF的发生率和死亡率显著相关。给药动物TNFα生物学活性处于持续低水平，而TNFα浓度水平则持续升高，与模型组相差显著。2、实验过程中，给药动物症状体征明 第二军医大学硕士学位论文 普通外科专业NN 显改善，器官功能和病理状态好转，MOF发生率降低，为43．7兄 死亡率下降，为 12．5化相差显著或非常显著。结论卜 TNF a在 MODS的发生发展过程中起十分重 要的作用，用 STNFRp75：FC可以对 MODS模型动物起到明显保护作用，TNF Q浓度 可能不是一个很好的临床观察指标，而 TNF a生物学活性检测则更能反映病变实际 情况。 第三部分观察了STNFRp75：FC对TNFR的影响。方法：采用Westel’n blot蛋 白免疫印迹技术，辅以图象分析系统，对正常组、模型组、给药组的各脏器组织 细胞膜表面的 TNFR表达量进行分析。伎累：1、正常组TNFRI和 TNFRZ都为低水 平表达，M00S模型鼠的两种TNFR表达明显增强付差显著），给予sW＊75：n 后各器官当中的两种TNFR都明显下降。2、在肺、肝、肾中TNFRI的增加程度大 于w叩2，在胃、肠中TNrRZ的增加程度大于TNFm，在心脏组织中二者的增加程 度相当。结论：TNFR的表达在导致MODS的过程中发挥重要作用。不同组织内，介 导MODS作用中占主要地位的TNFR类型可能不同。STNFR则可反作用于TNFR减少 其表达。