【摘 要】
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以人的垂体为材料，在垂体表达谱中发现了一个内分泌组织特异表达的新基因，用RT—PCR的方法从垂体cDNA库里克隆到了该基因。通过生物信息学分析发现新基因即为E2F-Like基因，它定
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以人的垂体为材料，在垂体表达谱中发现了一个内分泌组织特异表达的新基因，用RT—PCR的方法从垂体cDNA库里克隆到了该基因。通过生物信息学分析发现新基因即为E2F-Like基因，它定位于人体X染色体长臂的26.2位点上，其蛋白质具有E2F_TDP结构域，和E2F家族的DP1，DP2具有很高的同源性，故将其命名为DP3。成功地构建了DP3—1蛋白的原核表达载体pGEX—4T—1／dp3—1，筛选到最佳诱导条件为0.2mM IPTG，30℃，4hr，诱导后分离纯化得到了3mg DP3—1蛋白，用于免疫兔子以得到针对DP3—1蛋白的抗体，经过验证所得抗体的特异性和效价均很高。同时成功构建了dp3的真核表达载体pcDNA3.1／myc-His(-)A／dp3，并且证明了dp3基因在真核细胞中可以较好地得到表达，采用免疫荧光定位法发现DP3蛋白定位在细胞的胞浆中。构建了中国仓鼠卵巢细胞(CHO)稳定细胞株(CHO—AB4)，在该稳定细胞株基础上采用流式细胞仪检测细胞周期，发现稳定株的细胞S期明显比对照高，DP3具有促进细胞由G1期向S期转变的作用，说明DP3在细胞周期方面具有明显的作用。
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