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本论文分两个部分，分别研究了作为细胞信号通路调节基因的PP2Cκ和作为化学小分子代谢相关基因的HSDL2的初步生物学功能。蛋白质的磷酸化／去磷酸化作用是调节真核细胞内活动的一种重要方式，在细胞信号传导、细胞周期调控等许多过程中都起到至关重要的作用。我们从人胎脑cDNA文库中克隆到一个新的蛋白磷酸酶基因，PP2Cκ，其cDNA全长2034bp，编码一个372个氨基酸残基的蛋白质，该蛋白具有一个完整的蛋白磷酸酶2C催化结构域，属于丝苏氨酸磷酸酶中的PP2C亚家族。PP2Cκ基因定位于人染色体4q21-22，由7个外显子和6个内含子组成。逆转录PCR显示，该基因广泛的表达于所有我们检测的正常成人和胎儿组织，在成人脑、卵巢、心脏、胰腺、肾组织和胎儿心脏、胸腺等组织表达量相对较高。原核表达的PP2Cκ蛋白对磷酸化的苏氨酸多肽具有去酸磷化的丝苏氨酸磷酸酶活性。瞬时转染AD293细胞，发现PP2Cκ蛋白集中定位于细胞核内。PP2Cκ过量表达能够显著激活细胞内的热休克转录因子通路。我们通过进一步分析发现，PP2Cκ对热休克转录因子通路的激活，很可能是通过直接与热休克转录因子相互作用来实现的，PP2Cκ和热休克转录因子1(HSF1)在细胞核内呈共定位分布，体外相互作用实验证明二者有一定的结合能力。这为研究细胞热休克调控通路提供了一个新的研究方向。我们还利用酵母双杂交系统筛选可能与PP2Cκ有相互作用的蛋白，研究这些候选蛋白与PP2Cκ是否真的存在有相互作用，能够进一步揭示PP2Cκ这个广谱表达的丝苏氨酸磷酸酶在细胞内的生物学功能。类固醇脱氢酶参与体内固醇类物质代谢的反应，对哺乳动物的生长与发育起到了极为重要的作用。通过对人胎脑cDNA文库的大规模的序列分析，我们克隆到一条类似类固醇脱氢酶的cDNA，命名为HSDL2。该cDNA全长3211bp，编码一个418氨基酸的多肽。该蛋白包含了一个短链脱氢酶催化结构域以及一个固醇载体蛋白家族的SCP-2结构域，而且包含有短链脱氢酶家族典型的NAD(P)+辅酶结合位点(TGxxxGxG)及酶活性位点(S-Y-K)等保守基序。蛋白质序列分析表明HSDL2蛋白与小鼠及果蝇中的同源蛋白具有较高的相似性。该基因定位于人9号染色体长臂的32区，包含了11个外显子。逆转录PCR结果则显示该蛋白在人主要组织中广泛表达，尤其在肝、肾、前列腺、睾丸和卵巢中表达量很高。原核表达的HSDL2融合蛋白具有与辅酶NADPH结合的能力。细胞内绿荧光定位实验显示，该蛋白定位于细胞质中。细胞中过表达含有SCP2结构域胆固醇的HSDL2，发现细胞总胆固醇含量明显上升，这初步提示了该基因在胆固醇代谢过程中起到一定的作用。