【摘 要】
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肺癌是目前世界范围内发病率和死亡率较高的肿瘤类型之一,有必要开发更多效果良好且毒副作用较小的药物用于肺癌的防治。右旋柠烯是一种被广泛使用的植物提取物,已被报道对多种肿瘤具有防治作用。但右旋柠烯对肺癌的作用及其机制并不清楚。本研究的目的是探索右旋柠烯对肺癌的防治作用并对其机制进行初步研究。本课题使用体外研究、体内研究的方法探索右旋柠烯对肺癌细胞与肺癌肿瘤模型的作用。在体外研究中,使用Cell Cou
【基金项目】
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国家自然基金[No.81573231]右旋柠烯对DCBLD1易感基因型肺癌的预防作用研究
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肺癌是目前世界范围内发病率和死亡率较高的肿瘤类型之一,有必要开发更多效果良好且毒副作用较小的药物用于肺癌的防治。右旋柠烯是一种被广泛使用的植物提取物,已被报道对多种肿瘤具有防治作用。但右旋柠烯对肺癌的作用及其机制并不清楚。本研究的目的是探索右旋柠烯对肺癌的防治作用并对其机制进行初步研究。本课题使用体外研究、体内研究的方法探索右旋柠烯对肺癌细胞与肺癌肿瘤模型的作用。在体外研究中,使用Cell Counting Kit-8(CCK-8)进行细胞增殖实验,使用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。在体内研究中,使用乌拉坦对C57小鼠进行肺癌造模、使用A549肺癌细胞系建立肺癌移植瘤模型,并对两种肺癌模型的小鼠进行右旋柠烯灌胃处理。机制研究中,,使用流式细胞术检测细胞凋亡水平,使用Rhodamine 123染色、流式细胞术检测线粒体膜电位水平,使用免疫荧光法、共聚焦显微镜检测LC3小体水平,通过氯喹处理、使用小干扰RNA敲低ATG5基因降低细胞自噬水平,通过实时荧光定量检测(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,q PCR)、蛋白印迹法(western-blot)检测凋亡、自噬相关基因及蛋白的表达水平。研究结果表明,右旋柠烯对肺癌细胞系A549、H1299有明显的抑制增殖、抑制克隆形成、促进细胞凋亡作用,且其作用呈剂量依赖性。右旋柠烯可明显减少乌拉坦诱导的C57小鼠肺部的肿瘤数目,且右旋柠烯可显著抑制A549肺癌移植瘤的生长、减轻移植瘤重量。机制研究显示,右旋柠烯可显著降低线粒体膜电位水平,促进细胞凋亡和自噬基因的表达。抑制自噬后,右旋柠烯诱导的凋亡水平有所降低。综上所述,本课题对右旋柠烯对肺癌的防治作用及初步机制进行了研究。结果表明,右旋柠烯抑制肺癌细胞增殖、促进肺癌细胞凋亡,并通过促进自噬诱导肺癌细胞凋亡,对肺癌具有一定的防治作用。
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