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目的:探讨在体外实验中,应用B细胞特异性莫罗尼白血病病毒插入位点1(BMI-1)siRNA沉默BMI1基因来通过阻断髓样分化蛋白-2(MD-2)/Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)复合体调控的核因子-κB(NF-κB)信号通路,抑制结直肠癌细胞迁移和上皮间质转化(EMT),以应用于结直肠癌的靶向治疗中。方法:应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测人结直肠癌细胞白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA及蛋白的表达水平,应用RT-PCR和Western blot检测BMI-1、MD2、TLR4、MyD88mRNA及蛋白的表达水平,应用Western blot检测p-NF-κB p65、NF-κB p65、IκBα及波形蛋白(vimentin)、N-钙粘附蛋白(N-cadherin)、E-钙粘附蛋白(E-cadherin)的蛋白含量,采用四唑盐比色法(MTT)和Transwell小室(Transwell insert)评估人结直肠癌细胞的增殖和迁移能力的变化情况,应用BMI-1 siRNA沉默人结直肠癌细胞的BMI-1基因,应用细菌脂多糖(LPS)刺激人外周血单核细胞系(THP-1)获得THP-1条件培养基(THP-1-CM),以模拟LPS引起机体微环境的炎症状态。结果:在人结直肠癌细胞HT-29、HCT116中,THP-1-CM组相对于空白对照组、单独应用LPS组、单独应用THP-1组,可明显促进人结直肠癌细胞细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α基因的表达。THP-1-CM组相对于空白对照组,可促进人结直肠癌细胞BMI-1、MD2、TLR4、MyD88、vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白质的合成及NF-κB的磷酸化,促进细胞迁移和EMT,但对增殖无明显影响。在THP-1-CM处理后的人结直肠癌细胞HT-29中,BMI-1 siRNA组相对于NC siRNA组,可明显抑制BMI-1、MD2、TLR4、MyD88、vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白质的合成及NF-κB的磷酸化;抑制细胞迁移和EMT,但不影响增殖能力。结论:THP-1-CM可通过激活MD-2/TLR4/MyD88复合体调控的NF-κB信号通路,促进人结直肠癌细胞BMI-1基因及细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α基因的表达,从而促进人结直肠癌细胞的迁移和EMT。BMI-1 siRNA可阻断MD-2/TLR4/MyD88复合体调控的NF-κB信号通路,从而抑制THP-1-CM引起的结直肠癌细胞的迁移和EMT。说明BMI1在结直肠癌的靶向治疗中将可能成为一个重要的潜在靶点。