辅助生殖技术（assisted reproductive technology,ART）已广泛应用于多种不孕不育症的治疗,但仍存在一些无法明确和解决的不孕不育病因,例如卵子成熟障碍综合征（oocyte maturation defect,OMD）,也称为卵母细胞成熟阻滞,是一类较为罕见的原发性不孕症。其临床特征为:原发性不孕,重复产生大多数未成熟的卵母细胞,且无法体外培养至成熟,采用卵胞浆内单精子注射受精失败。该病的全球发病率尚无准确数据,病因尚未完全明确,现已发现可导致该病的机制如:缺乏或不完全黄体生成素（LH）峰、周围卵丘细胞的信号传导机制的紊乱、卵母细胞内在因子变化以及影响减数分裂的基因突变等。近年来探索单基因遗传病的致病基因及鉴定的常用方法有全基因组关联性分析或全外显子测序,其中全外显子测序（whole exon sequencing,WES）是指利用序列捕获技术,将全基因组中外显子区域DNA捕捉并富集后进行高通量测序的基因组分析方法。通过WES可确定改变蛋白质序列的遗传变异体,其高效性和经济实用性使得该技术被广泛用于遗传致病基因的研究。本研究从临床特征描述和致病基因鉴定两部分出发,探究OMD的临床特征及遗传致病基因。第一部分卵子成熟障碍综合征临床特征分析目的通过病例对照研究,回顾性分析卵子成熟障碍（oocyte maturation defect,OMD）类患者与正常患者（排除卵巢功能异常及影响卵子质量的相关疾病）的临床指标,初步了解OMD临床特点,分析是否存在该类患者的共性临床特征,为反复卵子成熟失败的患者提供更多助孕及治疗方面的参考依据。材料和方法依据OMD临床指征收集2010年1月1日至2018年12月31日在郑州大学第一附属医院生殖中心患者临床信息作为OMD组,同时随机筛选收集正常病人为对照组,使用SPSS统计软件,对计量资料进行单因素差异性检验,符合正态性的数据使用两独立样本t检验,不符合正态分布的数据使用wilcoxon秩和检验,进一步使用Logistic回归分析对该病的发生风险因素进行探究。结果本研究最终纳入29例患者作为OMD组（该病为罕见类疾病）,对OMD组共计78个治疗周期总结发现单纯性的卵母细胞发育阻滞（卵母细胞形态正常仅不成熟）约占OMD总周期的47%,其次为卵母细胞不成熟且伴有透明带异常或缺失约占总周期的23%,根据每名患者卵母细胞成熟障碍类型总结得出我中心MI型阻滞患者比例相对较多,约占31%,其次为混合型阻滞占24%。与对照组患者临床资料进行差异性分析发现两组患者年龄、抗苗勒管激素水平、雌激素水平差异有统计学意义,Logistic回归模型分析结果显示随着雌激素水平的降低发生卵子成熟障碍的风险增大（OR=1.056,P=0.027,95%CI:1.006-1.108）。结论我中心进行辅助生殖的OMD患者中MI型阻滞占比较多,其中卵子形态除发育阻滞外,透明带异常/缺失和卵子缺失的发生率较高。雌激素水平降低是OMD的发生的危险因素。第二部分卵子成熟障碍综合征致病基因鉴定目的本实验拟通过全外显子测序的方法寻找卵子成熟障碍的致病基因/突变,从而完善卵子成熟障碍的致病基因谱,并为卵子成熟障碍的遗传病因学研究提供更多的依据。材料和方法本研究收集郑州大学第一附属医院生殖中心数据中心卵子成熟障碍患者信息及其血样本,对患者进行更全面的病史询问和家系调查。通过提取患者外周血DNA,运用WES方法检测患者全外显子序列,使用数据库比对和软件分析等筛选方法发现候选的致病基因/突变,运用Poly Phen-2、Mutation Taster和Provean预测软件计算其致病性或有害性,预测其危害程度,进一步使用Sanger测序法在家系成员中进行验证,确定该基因在家系内遗传方式。结果根据WES结果,我们检测到TUBB8基因四号外显子存在一例未报道过的错义突变（NM₁77987.2）c.730G>A.p.Gly244Ser,预测发现该错义突变为有害且致病的突变,导致该患者表型为MI期阻滞。Sanger测序结果证实该患者家系中仅患者的父亲携带该突变,其他正常的家族成员中未被检测到这种突变。结论TUBB8基因4号外显子存在一个未报道的错义突变c.730G>A.p.Gly244Ser会导致MI型OMD的发生。