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本文研究了多孔二氧化硅空心微球的制备条件及形貌特点，并将其功能化之后，应用于生物亲和层析技术中，成功地纯化了猪胰蛋白酶。本文采用模板复制和溶胶—凝胶相结合的方法制备二氧化硅空心微球。以聚苯乙烯（PS）胶体微粒作模板，正硅酸乙酯（TEOS）为前驱体，溶胶—凝胶包覆的方法，成功制备SiO2空心微球。空心微球的行貌与模板材料密切相关，我们采用100mL无水乙醇：20mL苯乙烯：4.0g PVP：0.1g AIBN的反应物配比，70℃下制备出尺寸均一的PS微球。溶胶凝胶化时间与反应溶液配比、催化剂种类及用量有关。探讨了空心微球的形貌与反应物质量比的关系，当以1.5μm左右PS粒子作模板，TEOS：PS的质量比为2.0：3.0时，制备的SiO2空心微球从扫描电子显微镜（SEM）和透射电子显微镜（TEM）图像看到表面光滑且具有良好的球形形貌，微球的粒径约为1.40μm，球壁厚大约35nm～50nm且微球的表面存在大量的介孔。利用氮气等温吸附—脱附表征可以表明介孔的存在，BJH方法计算孔径在1.7nm～76nm之间，平均粒径约为3.2nm，BET方法计算材料的比表面积为235 m2／g，总的孔体积为0.1533 cm3／g。利用γ—氨基丙基三乙氧基硅烷（ATES）在空心微球球臂上引入氨基之后，经丙烯酸甲酯（MA）和乙二胺（EDA）交替反复聚合在空心球球臂上形成枝状多臂端基为氨基的聚合物，傅立叶红外（FT-IR）表明氨基的存在，氨基含量随着接枝次数的增加而增大，经测定最终氨基含量达到0.56mmol／g。以5％戊二醛溶液将鸡卵粘蛋白固定在SiO2空心微球上，用紫外仪测得材料偶联率为9.35％。通过TEM和原子力显微镜（AFM）可以观察到偶联了鸡卵粘蛋白的空心微球仍保持完好的球形形貌，且表面粗糙不平，表面上仿佛粘有颗粒状物质，AFM的二维图象的相位图也证明颗粒状物质是不同于基体的其他物质。将材料装柱后，采用分步收集法，每十分钟收集一次流出液，用紫外仪测量流出液的吸光度并绘图。用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）测定法测量得到高纯度的胰蛋白酶活力为9456.29（U／mg），是粗酶的8.7倍。总的酶活回收率为72.98％。说明氨基化的SiO2空心微球可以作为一种新的亲和层析载体来纯化猪胰蛋白酶，并且达到了纯化的目的。