降解丝素蛋白微生物的分离筛选及分类鉴定

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenchenhao
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随着蚕丝综合利用的进展,丝蛋白降解产物的用途日益广泛。目前降解丝素生产丝肽主要采用盐解法、酸解法、碱解法等化学方法,但盐解法只能得到大分子的再生丝素粉,酸解法和碱解法则不可避免地会造成氨基酸的破坏,并且这些方法都需要脱盐、脱酸等复杂的后处理。因此,采用酶解法生产丝肽是一种比较理想的方法,但丝素蛋白是一种典型的β-角蛋白,很难被普通的蛋白酶降解。虽然目前已从蚕蛾及微生物中分离到可以降解丝素的蛋白酶,但由于来源有限或稳定性差等原因,无法在实践中应用。有鉴于此,本文首次从土壤中分离到7株能以茧丝作为唯一碳源和氮源的微生物,探讨了这些微生物对丝素、羽毛等角蛋白的分解能力,并对其中一株降解能力最强的微生物的生物学特性和分类学地位进行了研究,从而为进一步深入研究微生物源丝蛋白酶奠定了基础。主要取得如下结果:1.以泰山柞树林和山东农业大学草坪的表层土为材料,通过建立适合目的微生物生长的条件,进行富集增菌;采用涂布与划线相结合的方法分离纯化培养物。最终得到7株可以利用丝素蛋白作为唯一碳源和氮源进行生长的培养物。2.对分离得到的7株可以降解丝素蛋白的微生物,根据其在不同温度、营养条件下对丝绸条的降解效果,以及对未经高温蒸煮的丝绸条的降解情况,进行了进一步的筛选。发现在这7株微生物中,编号为C3的放线菌降解丝素蛋白的活性最高。在缺乏碳源的情况下,可以在14d之内使丝绸条完全降解断裂,这与意大利学者分离得到的微生物相比,有更高的活性;C1、C2、C3等3个菌株对未经高温蒸煮的丝绸条也有较强的降解能力。3.各菌株对其他角蛋白的降解试验表明,对羽毛角蛋白无论是否经过高温蒸煮,这7株微生物都有良好的降解效果,只是未经高温蒸煮的羽毛,降解速度有所降低。各菌株对以羊毛为代表的α-角蛋白也有一定的降解能力,但活性较低,但羊毛经过高温蒸煮之后,更易于被降解。4.测定了C3菌株对丝素蛋白的降解活性以及温度和营养条件对其降解活性的影响。在28~37℃之间C3菌株对丝绸条均保持较高的降解活性;
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