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疣是人乳头瘤病毒(HPV)感染所致常见的皮肤科疾病之一,在临床工作中,常遇到如下困惑:发生在指(趾)间、腋下、腹股沟或口腔内形态酷似尖锐湿疣的皮疹如何诊断?发生在肛门、外生殖器的类似寻常疣且数年无变化的皮疹是否也诊断为尖锐湿疣?其HPV型别与寻常疣相同还是与尖锐湿疣相同?非生殖器部位皮损是否存在高危型HPV感染的可能?继发肿瘤的机会有多大?本研究拟通过了解此类“特殊皮肤疣”的形态、病理、HPV型别之间的相互关系,旨在回答临床工作中遇到的问题,寻找其分子生物学、临床治疗学和流行病学资料,为这组“特殊皮肤疣”诊治提供相应的理论基础,为预后提供一定的指导作用,并为进一步的深入研究奠定基础。全文具体分为三部分。第一部分“特殊皮肤疣”中人乳头瘤病毒的基因分型研究目的探讨特殊部位(趾间,腹股沟)皮肤疣、特殊形态(鸡冠状、菜花状)头面部疣和特殊形态(乳头状、丘疹状)生殖器疣等四组特殊皮肤疣的HPV基因型别分布。方法通过直接测序法对“特殊皮肤疣”中的HPV进行基因分型研究。根据测序所得到的型别,结合文献中皮肤疣的常见型别,分别设计型特异引物,通过型特异性PCR来验证和补充测序结果。结果(1)趾间组20例、腹股沟组29例,HPV型别以HPV7为主;头面部组30例HPV型别以HPV27、7为主;生殖器组18例HPV型别以HPV6、11为主,未检测到HPV7;HPV2、7、27、57是寻常疣组中HPV主要的型别,腹股沟组和生殖器组均出现高危型(HPV16)。与寻常疣对照组相比,趾间组、腹股沟组和生殖器组HPV7构成比差异有显著统计学意义(P值分别为0.000、0.000和0.011);而头面部组HPV7构成比差异无统计学意义(P=0.413)。(2)7对TSP-PCR的结果表明,在趾间、腹股沟、生殖器组均存在多种型别的混合感染。两种方法的型别符合率较高(80～99%)。结论趾间、腹股沟等皮肤皱褶处疣中HPV7的感染性较高,皮疹形态以菜花状、丘疹状为主。头面部菜花状疣HPV型别以HPV27、7为主,生殖器丘疹状疣HPV型别以HPV6、11为主,腹股沟疣和生殖器丘疹状疣中存在高危型HPV(HPV16)。各组均存在HPV混合型别感染。第二部分特殊皮肤疣的临床病理特征研究目的探讨“特殊皮肤疣”的临床和病理特征及各观察组的HPV基因型别与主要的临床病理特征之间的相关性。方法对趾间疣、腹股沟疣、头面部疣和生殖器疣四组“特殊”皮肤疣的临床和病理特征进行归纳和总结,对各观察组的HPV基因型别与主要的临床病理特征之间的相关性进行统计学分析。结果趾间组、腹股沟组患者均为男性,形态以菜花状、丘疹状为主,与寻常疣组形态相比,差异有统计学意义(菜花状P=0.011,丘疹状p=0.005)。疣体形态与HPV型别之间没有显著的关联性。共有56例患者的皮损作普通病理,表现寻常疣模式者18例,尖锐湿疣模式者16例,不易鉴别者22例。HPV7阳性(18份)的病理象特征:(1)乳头瘤样增生和棘层肥厚;(2)内含中等大小的透明角质颗粒的细胞深染;(3)显著的角化过度和角化不全。结论HPV型别与疣体形态之间的相关性无显著的统计学意义。特殊皮肤疣病理可表现为典型的寻常疣病理像或尖锐湿疣病理像,HPV7阳性的病理像具有特征性组织学改变。结合特殊皮肤疣中HPV型别分布,建议特殊部位(趾间,腹股沟)皮肤疣、特殊形态(鸡冠状、菜花状)头面部疣诊断为寻常疣;特殊形态(乳头状、丘疹状)生殖器疣诊断为尖锐湿疣。第三部分PCR产物的TA克隆及趾间皮屑HPV DNA的检测目的对趾间疣组中的基因型进行进一步验证,初步探索HPV7在趾间疣中的寄居或致病状态。方法采用PCR产物的TA克隆法对趾间疣组中的基因型进行进一步验证,设计趾间疣的病变阴性对照,取足癣患者和健康人群的趾间皮屑筛查有无HPV及HPV7的寄居。结果取趾间疣组12份DNA标本,TA克隆其通用引物PCR产物,每一份标本的4个TA克隆子中至少有1个成功合成质粒重组体,其测序所得序列与直接测序法所得的序列序均有90%以上的一致性。共采集趾间糜烂型足癣患者皮损处皮屑53例作为阴性对照和健康人群趾间皮屑48例作为空白对照,HPV的阳性率分别为(15.09%,8/53;16.67%,8/48),未检测到HPV7 DNA。结论测序型别可能是趾间疣的致病的HPV型别,趾间疣中所检测到的HPV7,可能处于致病状态,HPV7可感染免疫力正常的人群。