背景与目的:急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是由T祖细胞恶性扩散浸润骨髓而引起的一种未成熟的淋巴肿瘤。不同的急性T淋巴细胞白血病患者的预后差别很大,T-ALL耐药患者或者复发患者的处境不容乐观。目前的研究工作主要集中在开发更有效、副作用更小的抗白血病靶向药物,这对药物的特异性提出了更高的要求,所以也要求我们对T-ALL的发病机制有更精确的了解。在大多数T-ALL病例中NOTCH1是通过突变激活的,前期的科研工作者已经发现了急性T淋巴细胞白血病中NOTCH1导致白血病的主要致癌机制。在这个工作中,我们试图找寻具有促癌功能的NOTCH1辅助因子蛋白,这些蛋白可以在T-ALL细胞中靶向治疗疾病而不会引起毒性。我们在T-ALL中发现了影响NOTCH阳性T-ALL细胞生长的一个新成员,即在白血病中起关键作用的去泛素酶(DUB)蛋白,被称为泛素特异性蛋白酶7(USP7)。本文的研究目的是探究USP7在急性T淋巴细胞白血病细胞的生物学功能,并探究该功能作用的分子机制,以找到新的靶点,研发更加精准、副作用更小的靶向治疗药物用于治疗急性T淋巴细胞白血病。方法:利用细胞计数和细胞凋亡检测试剂盒检测沉默USP7和USP13对T-ALL细胞生长的影响;通过免疫共沉淀检测USP7和ICN1之间的结合作用;利用Western blot和RNA干扰技术检测沉默USP7对ICN1和MYB蛋白表达量的影响;利用Real-time PCR技术检测沉默USP7的效率;利用大肠杆菌表达质粒大量纯化技术和多克隆抗体技术制备ICN1蛋白抗体。结果:我们证实,敲低USP7会减缓T-ALL细胞的生长。然后我们通过免疫沉淀实验证明了ICN1和USP7的直接结合,这一结论使我们探索了这种效应的分子机制和生物学功能。最后,我们通过一系列实验验证了USP7可以调节MYB的蛋白质表达。这为我们控制NOTCH1通路并抑制T-ALL中提供了新的思路。本研究提示抑制USP7可能是该疾病的有效治疗靶点。Western blot显示免疫了ICN1抗原肽段蛋白后的白兔血清抗体可以和体外过表达的ICN1和T-ALL中提取的ICN1结合显色,证实表达蛋白是目的蛋白并且得到了正确的抗血清。结论:去泛素化蛋白USP7能够直接结合癌蛋白NOTCH1,调控癌蛋白MYB的表达,同时能够直接影响NOTCH1高表达的T-ALL细胞的生长,基于NOTCH1在急性T淋巴细胞白血病中的重要调控作用,我们的发现为临床上治疗NOTCH1高表达的急性T淋巴细胞白血病提供了潜在的治疗靶点。