核桃壳木醋液的生物活性与化学成分研究

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本文以核桃壳为材料,采用热裂解技术和化学分析手段,对核桃壳在热解过程中所产生的木醋液的生物活性和化学成分进行了研究;利用各化学成分酸碱性的差异,对其中不同酸性成分的分离方法和生物活性进行了研究;利用减压柱层析法对分离纯化酚类物质进行了初步探索,结果如下:(1)采用干馏的方法,分90-150℃、151-310℃、311-550℃三个温度段收集馏出液,分别测定各温度段木醋液的化学成分及其抗氧化活性。结果表明:三个温度段收集的木醋液中的化学成分相近,主要是酚类、有机酸、酮类和呋喃类衍生物,但相对含量各不相同。三个温度段收集的木醋液均表现出一定的抗氧化活性,其中311-550℃收集的木醋液的抗氧化活性最强,酚类物质的相对含量亦较高。(2)采用pH梯度萃取法分离核桃壳木醋液原液中不同酸性成分,并测定了各组分中有机酸和酚类物质的含量及其生物活性。结果表明:乙酸乙酯对有机物的萃取效果较好,萃取物较多。以5%NaHCO3溶液萃取原液分离有机酸效果较好,所分离组分的有机酸含量较高,抑菌活性较强:对番茄早疫、葡萄灰霉和苹果炭疽等3种植物病原菌的抑制率均达到90%以上。在浓度为20mg/mL时,对番茄早疫、棉花黄萎、葡萄灰霉、苹果炭疽等4种植物病原菌的抑制率均大于50%,EC50分别为:10.7529、16.3994、9.5618、18.5111 mg/mL;在浓度为5 mg/mL时,对枯草杆菌、灵杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为16.00mm、15.33mm和10.17mm,且当浓度升至20 mg/mL时,对枯草杆菌、灵杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径均可达20mm以上。不同碱液萃取母液后所得四个组分中,4%的NaOH溶液萃取母液后的木醋液中酚类物质含量最高,达到1334.374mg/L,约为木醋液原液中酚类物质含量的1.64倍;四个组分均显示有较强的抑菌活性和抗氧化活性;各萃取组分的抗氧化活性与其中酚类物质的含量基本呈正相关,对DPPH自由基的清除力达到85%以上,FeSO4的当量浓度为45.30mg/L,对亚油酸脂质过氧化的抑制率最高可达91.02%。6%的NaOH溶液萃取母液后的木醋液对钼离子的还原力最强,1g样品中所含的有效成分的含量相当于抗坏血酸的质量数约为1424mg。(3)采用减压柱色谱法对4%NaOH溶液萃取物进一步纯化。结果表明,在所收集到的四个组分中,组分F1中酚类物质的含量最高,抗氧化活性最强,且高于分离前的组分。
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