硫化氢对烧伤大鼠体外培养皮肤巨噬细胞MAPK信号传导通路ERK、JNK及p38蛋白作用的影响

来源 :青海大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:fairboy2000
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目的:探究H2S对烧伤大鼠体外培养皮肤巨噬细胞MAPK信号传导通路ERK、JNK及p38蛋白作用的影响。方法:将大鼠背部创面皮肤巨噬细胞当作实验对象,随机挑选30只健康的SD大鼠(雌雄不限),其中5只正常饲养,余下25只大鼠行烧伤造模后喂养,从正常饲养的5只大鼠中选1只设为正常对照组,从烧伤大鼠中选12只再随机分为4组(每组3只)设为实验对照组(烧伤对照组,NaHS(H2S供体)组1h、6h、12h,格列本脲(K+通道阻滞剂)组1h、6h、12h,NaHS+格列本脲组1h、6h、12h。正常对照组不做处理,余各组大鼠背部全部进行深II°5%TBSA损伤处理,分离背部创面皮肤基底巨噬细胞至78个培养瓶中,体外培养稳定后,正常对照组及烧伤对照组均加入200ul的PBS液,NaHS组中将终浓度调整为200umol/L的NaHS加入到培养基中,格列本脲组中将终浓度调整为200umol/L的GLBN加入到培养基中,NaHS+格列本脲组中加入相同终浓度为200umol/L的NaHS和格列本脲,以上每组作用时间均设定为1h、6h、12h。分别在对应时间点对ERK、JNK、p38蛋白进行Western Blot免疫印迹分析。结果:1、各组间ERK蛋白表达量之间比较:(1)烧伤对照组与正常对照组ERK蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05),(2)在同一时相点,NaHS组与各组别ERK蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05),(3)NaHS+GLBN组与GLBN组ERK蛋白表达量差异比较有统计学意义(P<0.05),(4)GLBN组与烧伤对照组ERK蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05)。2、各组间JNK蛋白表达量之间比较:(1)烧伤对照组与正常对照组JNK蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05),(2)在同一时间点,NaHS组与各组别JNK蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05),(3)NaHS+GLBN组与GLBN组JNK蛋白表达量差异比较有统计学意义(P<0.05),(4)GLBN组与烧伤对照组JNK蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05)。3、各组间p38蛋白表达量之间比较:(1)烧伤对照组与正常对照组p38蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05),(2)在同一时相点,NaHS组与各组别p38蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05),(3)NaHS+GLBN组与GLBN组p38蛋白表达量差异比较有统计学意义(P<0.05),(4)GLBN组与烧伤对照组p38蛋白表达量差别之间比较有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)烧伤后ERK表达减少而JNK和p38表达增多;(2)烧伤后给予微量的H2S使ERK蛋白相对表达量升高,JNK和p38蛋白相对表达量下降;(3)格列本脲能够抑制K+通道开放,使ERK蛋白相对表达量下降,JNK和p38蛋白相对表达量提高;(4)外源性H2S能够通过K+通道提高ERK表达且减低JNK和p38表达,从而对巨噬细胞MAPK信号通路产生影响。
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