【摘 要】
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一 研究背景与目的: 肝细胞癌(Hepatocellulorr Carcinoma,HCC)是我国发病率较高的恶性肿瘤之一,目前采取手术切除为主的综合治疗,但是疗效仍不十分理想,严重威胁人们的健康
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一 研究背景与目的: 肝细胞癌(Hepatocellulorr Carcinoma,HCC)是我国发病率较高的恶性肿瘤之一,目前采取手术切除为主的综合治疗,但是疗效仍不十分理想,严重威胁人们的健康和生命。肝细胞癌具有进展较快、易转移复发、预后较差的特点。肝细胞癌的转移和复发是在多因素影响下的一个多步骤、多阶段的复杂过程,对其发生、发展、侵袭转移机制的尚未明确。凝血酶敏感蛋白(Thrombospondin,TSP)是一组多功能糖蛋白,TSP-1是其中最重要的成员,可被多种细胞合成并分泌至细胞外基质中,与细胞表面的受体相互作用而发挥多种生理功能,近年来发现TSP-1可被多种肿瘤细胞合成分泌,在调节肿瘤细胞的生长、粘附、迁移等生物学行为和肿瘤的新生血管形成中发挥重要作用。已有研究证实在其他肿瘤中TSP-1的合成及分泌的变化与肿瘤的进展有密切关系。但是TSP-1对肝癌的作用尚未见报道,本文通过一系列实验探讨TSP-1对肝癌细胞株生物学行为的影响,初步研究其作用机制,并在裸鼠移植瘤的试验中给予验证。 二 试验方法 1 TSP-1、CD36、CD47在肝癌细胞株中的表达及人肝癌细胞株的选择: 用Western blot方法检测人肝癌细胞株HCCLM3、MHCC97,HepG2、SMMC—7721细胞株中TSP-1及其受体CD36,CD47蛋白的表达,选择TSP-1阴性表达或者低表达,并且表达其受体CD36,CD47的细胞株作为研究对象。 2 MTT试验细胞株浓度的选择: 把人肝癌细胞株根据细胞浓度的不同分为四组:5×10~3/ml、1×10~4/ml、2×10~4/ml、5×10~4/ml。建立生长曲线,选择合适的细胞浓度进行MTT试验。 3 TSP-1浓度及作用时间点的选择:
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