SeMNPV诱导斜纹夜蛾细胞凋亡及SpltMNPV p49基因的研究

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本文首次报道了甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodopteraexiguamulticapsidnucleopolyhedrovirus,SeMNPV)感染诱导了斜纹夜蛾(Spodopteralitura)细胞发生凋亡,并对斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)抗细胞凋亡基因p49进行了系统研究。   本文对SpltMNPV全基因组序列分析结果显示,SpltMNPV基因组中存在两个可能的抗细胞凋亡基因,即p49和iap,本文选择p49基因进行功能研究。   本文还综合利用Bac-to-Bac和ET重组的策略,构建p49基因取代p35基因的重组AcMNPV,以该重组病毒感染AcMNPV非受纳细胞系Sl-zsu-1细胞,探讨细胞凋亡与宿主范围的关系。 本文通过PCR方法扩增p35基因的上下游序列,再经过克隆将抗性基因Cm连入p35基因的上下游序列之间构成缺失p35基因的线性DNA同源片段。说明SpltMNPVp49基因能够完全取代AcMNPVp35基因,抑制病毒感染引起的细胞凋亡。推断SeMNPV和AcMNPV诱导Sl-zsu-1细胞凋亡的决定因素应该是细胞本身,而与病毒凋亡抑制基因的种属性无关。
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