磷及纳米量子点探针的共振光散射分析

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在天然水和废水中,磷以磷酸盐的形式广泛存在,磷是生物生长的必需元素之一但水中磷含量过高会造成水体的富营养化。磷的检测在很多领域包括环境、临床及工业检测中至关重要。目前现有的磷测定方法虽各有优势,但都存在不同程度的局限性,因此研究普遍适用性好、操作简便、灵敏度高的磷检测新方法具有重要意义。自70年代以来,生命科学研究的快速发展推动了具有高灵敏检测特点的荧光分析的进一步发展。具有可识别功能的新型荧光探针的合成,特别是纳米荧光量子点分析技术的提出,在基因和蛋白质分析过程中发挥了重要作用并显示出进一步的应用潜力。本文研究了水中磷的共振光散射分析检测法,为水中痕量磷的测定提供了灵敏的检测手段;以纳米量子点为探针,测定了牛血清蛋白,建立了一种利用荧光法和共振光散射法测定蛋白质的新方法。本文分为两个部分:第一部分:基于磷钼蓝法利用共振光散射技术测定磷本文利用共振光散射技术,基于传统的钼锑抗分光光度法,建立了检测磷的新方法。研究发现,在0.09 mol/L的硫酸溶液中,钼酸铵与磷酸根反应生成磷铝杂多酸并被抗坏血酸还原生成磷钼蓝,磷钼蓝在340~550 nm波长范围内能产生强烈的共振光散射信号。基于此现象建立了一种简单、灵敏的检测磷的方法。线性范围是2.0~40.0 ng/mL,检出限(3σ)为0.76 ng/mL。本法灵敏度比钼锑抗分光光度法提高一个数量级。第二部分:利用纳米量子点探针测定牛血清蛋白研究发现,在合适的条件下通过静电相互作用,纳米量子点CdS在蛋白质模板上聚集,大的聚集体形成或聚集体中相邻粒子之间电子的偶极-偶极相互作用和共轭效应导致体系产生强烈而稳定的共振光散射,在0.01μg/mL-1μg/mL的蛋白质浓度范围内共振光散射强度同蛋白质的浓度成正比。此外量子点本身有荧光,与蛋白质静电结合导致荧光淬灭,在0.5μg/mL~5μg/mL的蛋白质浓度范围内荧光强度同蛋白质的浓度成反比,基于此现象我们建立了利用一种探针采用两种方法同时测定的蛋白质检测方法,实现了两种方法互相验证。
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