论文部分内容阅读
左旋多巴是主要的临床上治疗帕金森氏病的药物。猫豆是广西特色食药两用的资源植物,猫豆种子中含有6%-9%的天然的左旋多巴,从猫豆中提取精制左旋多巴成为当地一大特色产业。对其提纯工艺以及分析检测方法的研究势必会提高猫豆的经济产值。本文首先在研究国内外针对左旋多巴定量测定的基础之上,通过对高效液相色谱法色谱条件的摸索,确定出定量检测左旋多巴的液相条件:色谱柱为岛津C-18甲基硅烷柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为甲醇:0.1 mol/L醋酸溶液（10:90,v/v）;紫外检测器灵敏度:0.05 AUFS,检测波长280nm;流速:1.0 m L/min;柱温:室温。同时,为了找出一个适合工厂生产快速定性检测左旋多巴的方法,通过紫外分光光度法,利用左旋多巴和三氯化铁在酸性条件下的络合反应生成的络合物在紫外下有吸收,确定该络合物的最大吸收波长为281nm。并以L-DOPA与Fe Cl3络合物的吸光度值与L-DOPA的浓度制作标准曲线,得出:左旋多巴的浓度在50～1600μg/m L范围内线性关系良好,回归方程为:Y=0.0005x+0.2242。（R2=0.9927）对左旋多巴精制品其含有的主要杂质成分进行定量定性分析。结合文献分析,对其可能存在的杂质左旋酪氨酸和左旋苯丙氨酸进行氨基酸分析确证,并利用高效液相色谱法,探究其检测方法,最后确立条件:在紫外检测下,液相条件为:色谱柱:Dikma Spursil C18柱（250×4.6mm,5μm）;流动相:2%乙酸溶液-甲醇（90:10）;流速:0.8m L/min;检测波长:260nm;柱温:室温;能够检测左旋多巴和左旋苯丙氨酸;在荧光检测下,液相条件为:色谱柱:Dikma Spursil C18柱（250×4.6mm,5μm）;流动相:0.8%甲酸-乙腈（98:2）;进样量:10μL;检测波长:Sig=280nm,Ref=314nm;柱温:室温;能够检测左旋多巴与左旋酪氨酸。并利用此液相条件,制作左旋酪氨酸和左旋苯丙氨酸的标准曲线,定量其杂质含量。在准确可行的检测分析方法基础上,在实验室参照实地猫豆中提取左旋多巴的工艺流程进行粗提左旋多巴。猫豆粗提左旋多巴工艺主要借助732型强酸阳离子树脂对酸提的左旋多巴原料液进行吸附提取,对洗脱液氨水中和,结晶,洗涤,得出左旋多巴粗制品。测量粗制品中左旋多巴的含量,在含量为40%-60%之间的称为左旋多巴粗制品,并利用公式:左旋多巴粗制品得率=烘干后的左旋多巴粗品质量×左旋多巴含量/烘干后的猫豆原料质量×100%,计算出左旋多巴粗制品得率为（35±5）%。并对左旋多巴的不同状态下的稳定性作了研究,左旋多巴在溶液状态下稳定性良好;在结晶状态下,在100℃时不稳定,损失较大。精制过程主要采取重结晶工艺。对左旋多巴粗品进行盐酸溶液,活性炭吸附,氨水溶液中和结晶,乙醇溶液洗涤,得出左旋多巴精制品,经测量其含量≥98%;通过公式:左旋多巴精制品得率=（烘干后的左旋多巴精制品质量×左旋多巴含量/烘干后的左旋多巴粗品质量×左旋多巴含量）×100%,发现不同条件下的得率差别很大。通过选定合适的影响因素（盐酸浓度,液料比,料炭比）进行单因素实验,并选择合适的水平,以得率为重要的参考指标,进行了多组实验。选择得率最大的时候的精制条件:盐酸浓度为0.56mo L/L,液料比为10,料炭比为10,精制品得率是67.89%。通过响应面分析法得出的最佳精制条件是:盐酸浓度是0.57mo L/L,液料比是12.12,料炭比是9.62,在这种工艺条件下得到L-Dopa精制品得率的理论值是70.03%,实际验证值与分析结果的理论值之间的相对误差2.83%,说明盐酸浓度为0.56mo L/L,液料比为10,料炭比为10为最佳优化条件。并对优化条件下的左旋多巴精制品进行杂质分析。