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猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的急性肠道传染病。患病猪临床上表现为水样腹泻、严重脱水、呕吐等特点,造成生猪养殖行业严重的经济损失。当前该病仍无特效治疗药物,一般常依靠接种疫苗来预防腹泻疾病的发生。临床上时有猪场免疫疫苗后大面积的发生腹泻,故亟需对规模化猪场PED疫苗的防控效果进行调查研究。因此本研究拟通过调查安徽部分地区152家规模化猪场对PED的防控效果、腹泻猪场紧急免疫效果以及PEDV流行毒株S基因进化开展分析,旨在确定不同腹泻疫苗临床免疫效果和PEDV流行毒株的亲缘关系,为临床上科学合理选择腹泻疫苗免疫提供重要的参考依据。(1)研究安徽部分规模化猪场PED疫苗免疫预防效果的评估。本研究通过调查统计了152家规模化猪场的PED疫苗免疫效果、初产与经产母猪分娩窝数发病率和病死率。结果显示,总计发病猪场有55家,发病率为36.2%。其中方案1:不免疫腹泻疫苗的猪场共22家,腹泻发病率为77.3%;方案2:免疫腹泻三联活疫苗与二联灭活苗的猪场共89家,腹泻发病率为19.1%;方案3:免疫死苗+死苗的猪场共41家,腹泻发病率为56.1%。另外采用普免+跟胎方式免疫方案2的猪场有31家,腹泻发病率为3.2%;普免方式免疫方案2的猪场有33家,腹泻发病率为30.3%;跟胎方式免疫方案2的猪场有25家,腹泻发病率24.0%。共统计152家猪场初产母猪分娩总窝数为780窝,腹泻发病窝数比率为49.9%,病死窝数比率为65.8%;经产母猪分娩总窝数为408窝,腹泻发病窝数比率为34%,病死窝数比率为40.3%。综上结果可提示,采用普免+跟胎方式免疫方案2对防控猪场PED的效果最佳,且经产母猪分娩仔猪的发病率和病死率更低,为实际生产中猪场科学选择腹泻疫苗进行PED的防控提供重要的数据参考。(2)研究腹泻猪场紧急免疫效果的评估。本研究通过选择16家免疫腹泻疫苗后仍发生腹泻疫情的猪场进行紧急免疫方案2,统计紧急免疫前后各规模场的发病和病死的仔猪窝数、以及紧急免疫后猪群的恢复情况。结果显示,共统计16家发病场197窝仔猪,紧急免疫前腹泻发病窝数比率为52.8%,病死窝数比率为72.1%;紧急免疫后腹泻发病窝数比率为28.84%,病死窝数比率为30%。猪群紧急免疫恢复情况显示,25.0%的猪场于免疫后5天恢复正常;50.0%的猪场于免疫后7天恢复正常;18.8%的猪场于免疫后9天恢复正常;6.2%的猪场于免疫后13天恢复正常。综上结果可提示,紧急免疫执行方案2后猪群腹泻发病率和病死率降低,并大多数猪场于紧急免疫后9天恢复正常,从而为猪场积极应对腹泻疫情的防治提供参考价值。(3)研究安徽部分猪场腹泻病料的PEDV PCR鉴定及S基因的进化分析。通过使用RT-PCR方法检测腹泻猪场送检病料30份,并对PEDV阳性样品进行S基因测序分析。结果显示,送检病料PEDV阳性率为70%;成功扩增7段S全基因序列,经比对7株安徽地区PEDV分离株S基因之间的核苷酸序列的同源性为97%-100%;7株PEDV分离毒株均属于G1群,与PEDV变异株的亲缘关系为97%以上,而与经典CV777株的亲缘关系仅为94%。为研究安徽地区PEDV分子流行病学调查奠定理论基础。综上所述,本研究通过调查不同规模化猪场腹泻疫苗免疫防控效果及PEDV S基因进化分析得到:采用普免+跟胎方式免疫腹泻弱毒疫苗与灭活疫苗可明显的降低PED的发病率和病死率,且紧急免疫后9天内大部分猪场可恢复正常;另外安徽部分地区PEDV地方流行毒株与变异株亲缘关系为97%以上,而与经典CV777株仅为94%。为安徽地区腹泻疫苗免疫和PEDV流行病学调查提供良好的技术基础。