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目的本文通过用D-半乳糖背部注射建立衰老模型，用现代药理学和免疫学方法观察脾肾双补治法对实验小鼠脾脏、胸腺组织内SOD、MDA、IL-2含量、脾脏淋巴细胞CD28的表达，脾脏和胸腺细胞DNA氧化损伤的影响，探讨该治法对衰老的作用机制，为廷缓衰老和防治老年性疾病实践开拓了思路。方法2月龄昆明种小鼠60只，20±2g，随机分为6组：正常组、模型组、VitE组、脾肾双补法方治疗大剂量组(简称治疗大剂量组)、脾肾双补法方中剂量组(简称治疗中剂量组)，脾肾双补法方小剂量组(简称治疗小剂量组)。采用单细胞凝胶电泳法检测脾肾双补法对脾脏和胸腺细胞DNA氧化损伤修复的影响，取脾脏胸腺组织匀浆分别检测SOD、MDA含量，脾脏匀浆检测IL-2、CD28的表达。结果模型组彗星细胞尾长与正常组脾脏细胞相比具有显著性差异(P＜0.01)，VitE组和中药各组的彗星拖尾长度均较模型组减短，有显著性差异(P＜0.01)，与VitE组比较，大、中剂量组有显著性差异(P＜0.01)，与小剂量组无差异，与大剂量组比，中、小剂量组均有显著性差异(P＜0.01)。与正常组比较，模型组胸腺细胞尾长有显著性差异(P＜0.01)。与模型组比较，中、大剂量组均有显著性差异(P＜0.01)，VitE组和小剂量组有差异(P＜0.05)，与VitE组相比，大剂量组有显著性差异(P＜0.01)，中剂量组有差异(P＜0.05)，小剂量组无差异。与大剂量比较中、小剂量均有显著性差异(P＜0.01)。模型组脾脏组织SOD含量与各组相比均有显著性减少(P＜0.01)。与VitE组比较，大、中剂量组均有显著性差异(P＜0.01)，小剂量与VitE组无差异(P＞0.05)，与大剂量组比较，中剂量组有差异(P＜0.05)，小剂量组有显著性差异(P＜0.01)。与正常组比较，模型组胸腺组织SOD含量有显著性差异(P＜0.01)。与模型组相比，余胸腺各组均于之有显著性差异(P＜0.01)，与VitE组相比，大剂量有显著性差异(P＜0.01)，中剂量有差异(P＜0.05)，小剂量无差异。与大剂量组比较，小剂量组有差异(P＜0.05)，中剂量组无差异。模型组MDA含量明显高于各组脾脏中MDA的含量(P＜0.01)。与VitE组比较，中、大剂量有显著性差异(P＜0.01)，小剂量有差异(P＜0.05)，与大剂量组比较，小剂量有显著性差异(P＜0.01)，中剂量有差异(P＜0.05)。与正常组比较，模型组胸腺中MDA含量有显著性差异(P＜0.01)。模型组中MDA含量明显高于胸腺各组(P＜0.01)，与VitE组比较，中剂量有差异(P＜0.05)，大剂量有显著性差异(P＜0.01)，小剂量与VitE组无差异(P＞0.05)。与大剂量组比较，小剂量有显著性差异(P＜0.01)，中剂量无差异。正常组、大、中剂量组IL-2水平与模型组相比均有显著性提高(P＜0.01)，VitE组和小剂量与之有差异(P＜0.05)。与VitE组比较，大、中剂量均有差异(P＜0.05)，小剂量组无差异(P＞0.05)。与大剂量组比较，小剂量有显著性差异(P＜0.01)，中剂量无差异。CD28在正常组和大、中、小剂量组的表达与模型组相比均有显著性提高(P＜0.01)，VitE组与之无差异(P＞0.05)。与VitE组比较，大、中剂量组有显著性差异(P＜0.01)，小剂量有差异(P＜0.05)。与大剂量组比较，中、小剂量组无差异(P＞0.05)。结论本实验采用单细胞凝胶电泳技术，研究了脾肾双补法对D-半乳糖衰老模型小鼠脾脏和胸腺细胞的DNA氧化损伤的影响。发现脾肾双补法方可以减少彗星拖尾长度，增强DNA修复能力，使衰老时DNA修复的能力明显提高，脾肾双补法能有效的廷缓衰老。实验结果显示，脾肾双补法可以明显提高衰老模型小鼠中SOD的活性，提示可以通过增强SOD活力而提高对自由基清除的能力，减少自由基的损害而廷缓衰老，同时降低MDA的含量，降低过脂质过氧化的程度，延缓衰老。实验结果表明脾肾双补药治疗组可提高衰老机体IL-2的水平，可能是通过提高IL-2水平来发挥IL-2重要的免疫活性，从而调节免疫功能而延缓衰老。实验结果表明，衰老模型小鼠脾脏淋巴细胞CD28比例低于正常组，提示衰老可能使CD28分子对衰老小鼠淋巴细胞的重要活化作用下降，而中药各剂量组表达水平较衰老模型组增高，提示脾肾双补法可以提高衰老模型小鼠脾脏淋巴细胞CD28比例，作用机制可能是其提高了IL-2的水平刺激淋巴细胞增殖，从而增强了机体调节CD28分子的表达水平。