【摘 要】
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驴绒毛膜促性腺激素(dCG),是在怀孕母驴血清中发现的一种糖蛋白激素。此类激素在妊娠马属动物(马,斑马等)中都有产生。主要作用为促进卵泡发育,同时有一定的促排卵和黄体形成的功能;对雄性动物具有促使精细管发育和生殖细胞分化的功能。目前市面售卖的主要是马属动物绒毛膜促性腺激素(e CG),又名孕马血清(PMSG)。为了提高养驴效益,开发其产品,研究dCG作用于临床的可行性,本研究采集了不同年龄(4-7
【基金项目】
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内蒙古自治区科技重大专项,肉驴规模化生态养殖技术集成及产业化示范(zdzx2018001); 呼和浩特市重大科技专项,创新型乳制品技术开发并产业化与肉驴规模化生态养殖技术集成示范——肉驴规模化生态养殖技术集成示范(2018-农-重-6);
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驴绒毛膜促性腺激素(dCG),是在怀孕母驴血清中发现的一种糖蛋白激素。此类激素在妊娠马属动物(马,斑马等)中都有产生。主要作用为促进卵泡发育,同时有一定的促排卵和黄体形成的功能;对雄性动物具有促使精细管发育和生殖细胞分化的功能。目前市面售卖的主要是马属动物绒毛膜促性腺激素(e CG),又名孕马血清(PMSG)。为了提高养驴效益,开发其产品,研究dCG作用于临床的可行性,本研究采集了不同年龄(4-7岁),不同怀孕天数(60天,90天,120天)的孕驴血清,并探索利用硫酸铵盐析与疏水作用层析结合法在dCG纯化中的作用;并将纯化后的dCG与市售的e CG利用4周龄昆明鼠作对比试验,进行超数排卵,分析dCG对小鼠促进卵泡发育的作用效果。结果表明:1.研究发现孕驴血清中的dCG含量与妊娠天数有关。妊娠90天时,dCG活性浓度均值为0.99 IU/mg,显著高于孕60天时的0.36 IU/mg和120天时的0.42 IU/mg。在妊娠90天时,5岁孕驴的比活均值最高,为2.47 IU/mg,而此时4岁、6岁、7岁孕驴的比活均值分别为0.55 IU/mg、0.38 IU/mg、0.27 IU/mg。2.采用硫酸铵对孕驴血清进行粗分离,当溶液为50%饱和硫酸铵时,约90%杂蛋白被沉淀,且活性损失小,蛋白回收率达88%,溶液比活提高了7.12倍;随后采用疏水作用层析对粗分离后的dCG进行纯化,比活由原样品的4.83 IU/mg提高到563.67IU/mg,溶液比活提高了117倍。3.在大鼠卵巢增重法实验中,dCG对卵巢增重效果显著。在小鼠超排实验中,dCG对KM鼠的超排效果与e CG接近,可以认为,本研究中纯化的dCG具有与市售的e CG相同的生物活性及作用能力,未来可以考虑在生产中推广。
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