目的：TDRG1基因是本课题组电子克隆的人睾丸特异表达基因。前期的研究提示该基因可能与睾丸肿瘤的发生发展相关,并利用RNA干扰技术(RNAi)成功在人睾丸生殖细胞肿瘤NTERA-2细胞中构建了下调TDRG1基因mRNA表达的稳定系统。本研究拟在前期工作基础上,进一步验证靶向TDRG1基因mRNA的shRNA重组质粒对NTERA-2细胞中TDRG1基因表达的干扰作用,探讨TDRG1基因对NTERA-2细胞生物学特性的影响。方法：1.RT-PCR及细胞免疫荧光(IF)检测TDRG1基因mRNA及蛋白在NTERA-2细胞和小鼠睾丸畸胎瘤F9细胞中的表达。2.利用已构建的TDRGl-shRNA重组质粒在体外转染NTERA-2细胞,实时定量PCR (qRT-PCR)及IF检测转染后NTERA-2细胞TDRG1基因mRNA及蛋白表达的变化。3.采用MTT实验、Tranwell实验及流式细胞仪检测转染后NTERA-2细胞体外增殖、侵袭能力及凋亡潜能的变化。结果：TDRG1-shRNA486及TDRG1-shRNA/control重组质粒体外成功转染NTERA-2细胞。相对于空白对照组及阴性转染组,TDRG1-shRNA486重组质粒体外显著降低NTERA-2细胞TDRG1基因mRNA及蛋白的表达(P<0.05)。TDRG1基因mRNA及蛋白表达显著降低后,实验组NTERA-2细胞体外增殖、侵袭能力下降,而凋亡潜能增加(P<0.05)。结论：1.前期构建的TDRGl-shRNA486重组质粒载体可稳定、高效干扰NTERA-2细胞TDRG1基因,降低TDRG1基因mRNA及蛋白的表达,成功构建了体外TDRG1基因低表达的睾丸生殖细胞肿瘤细胞模型。2.TDRG1基因正向调控NTERA-2细胞的增殖、侵袭能力,负向调控凋亡潜能,具有癌基因性质。