稀有人参皂苷的亚临界水定向转化方法研究

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人参皂苷是人参属植物的主要药效成分,分为常见人参皂苷和稀有人参皂苷,常见人参皂苷就是人参属植物中含量丰富的人参皂苷,稀有人参皂苷就是人参属植物中通常没有或极少存在的人参皂苷。药理研究表明,相比于常见人参皂苷,稀有人参皂苷具有更为突出的抗肿瘤、抗疲劳、抗氧化等生物活性。因此,深入研究稀有人参皂苷的新制备方法不仅具有重要的学术意义,而且对探索稀有人参皂苷的新医学用途具有重要意义,是目前人参属植物化学成分的研究热点。本研究以人参皂苷Re、Rb1、Rg1三种常见人参皂苷为研究对象,为常见人参皂苷快速高效定向转化为稀有人参皂苷提供科学依据,并利用亚临界水转化法、响应面法、单因素实验,优化将常见人参皂苷转化为稀有人参皂苷的工艺,为该工艺提供技术支持。第一章概述了人参皂苷的研究进展,特别是对稀有人参皂苷的常见制备方法及其药理作用进行了概述;介绍了亚临界水的基本性质及应用;简述了HPLCESI-Q-TOF-MS技术的应用优势及应用。第二章材料为人参皂苷Re,应用亚临界水转化法进行定向转化,通过单因素试验考察了提取时间、提取温度、人参皂苷Re/甘氨酸质量比三个因素,运用Design-Expert 8.0.6.1软件设计试验和拟合试验数据,优化得到最佳转化人参皂苷Rh4工艺为温度156℃、时间13 min,人参皂苷Re/甘氨酸质量比为0.49,得到最高人参皂苷Rh4的相对含量为201±5 m V*min;最佳转化人参皂苷Rk3工艺为温度156℃、时间15 min,人参皂苷Re/甘氨酸质量比为0.53,得到最高人参皂苷Rk3的相对含量为209±4 m V*min;最佳转化人参皂苷20(S)-Rg2工艺为温度193℃、时间29 min,人参皂苷Re/甘氨酸质量比为1.1,得到最高人参皂苷20(S)-Rg2的相对含量为1118±13 m V*min;最佳转化20(R)-Rg2工艺为温度184℃、时间32 min,人参皂苷Re/甘氨酸质量比为0.93,得到最高20(R)-Rg2的相对含量为859±9 m V*min。利用单因素试验优化得到转化人参皂苷Rg6、F4的最佳工艺为温度180℃、时间30 min,人参皂苷Re/甘氨酸质量比为1。第三章材料为人参皂苷Rb1、Rg1,应用亚临界水转化法进行定向转化,通过单因素试验考察了提取时间、提取温度、Rb1/甘氨酸质量比三个因素,优化得到最佳转化人参皂苷20(S)-Rs3、20(R)-Rs3的工艺为温度156℃、时间13 min,人参皂苷Rb1/甘氨酸质量比为0.49;最佳转化人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3工艺为温度160℃、时间50 min,Rb1/甘氨酸质量比为2;最佳转化人参皂苷Rk1、Rg5工艺为温度220℃、时间30 min,人参皂苷Rb1/甘氨酸质量比对实验影响不大。优化得到最佳转化人参皂苷Rk3、Rh4的工艺为温度220℃、时间20 min,Rg1/甘氨酸质量比为1;转化人参皂苷20(S)-Rh1、20(R)-Rh1的最优工艺为温度160℃、时间50 min,人参皂苷Rg1/甘氨酸质量比为1。第四章对第二、三章稀有人参皂苷定向转化产物进行了微量成分的结构解析。通过HPLC-Q-TOF-MS/MS研究结构碎片,根据二级质谱离子碎片解析了稀有人参皂苷定向转化产物的结构。人参皂苷Re的定向转化产物中解析出6个稀有人参皂苷,人参皂苷Rb1的定向转化产物中解析出6个稀有人参皂苷,人参皂苷Rg1的定向转化产物中解析出4个稀有人参皂苷。
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