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第一部分RASSF1A和APC基因在NSCLC甲基化改变目的:探讨经5-氮杂胞苷去甲基化影响肺癌A549和H358细胞株生长、增殖、侵袭和凋亡后RASSF1A和APC基因的甲基化改变。方法:首先,采用5-氮杂胞苷(3μmol/L)处理A549和H358细胞株24h和48 h后,运用流式细胞仪检测细胞周期分布,Transwell方法检测细胞侵袭能力,赫斯特染色荧光显微镜观察细胞凋亡。其次,采用RT-PCR和Western blot检测5-Aza-d C处理后RASSF1A和APC基因在两细胞株中m RNA转录和蛋白表达。结果:经5-氮杂胞苷处理后,A549和H358细胞株生长逐渐停滞,侵袭能力减弱,凋亡增加,且侵袭能力和凋亡程度与作用时间呈正比关系;两组肺癌细胞株中RASSF1A和APC基因转录和表达增加。结论:5-氮杂胞苷可以通过基因去甲基化而使肺癌细胞功能减弱甚至丧失,并且该过程中有RASSF1A和APC基因启动子区域去甲基化参与。第二部分NSCLC相关抑癌基因甲基化的META分析目的:DNA甲基化已被确定为肿瘤检测和诊断的潜在有力工具。然而,应用基于血液中抑癌基因甲基化作为NSCLC检测和诊断的生物标志物的相关性仍待阐明。该Meta分析旨在评估外周血液样本中检测到的抑癌基因甲基化作为非侵入性生物标志物在NSCLC中的诊断价值。方法:通过计算机检索CNKI数据库、万方数据库、中文科技期刊数据库、PUBMED、EMBASE,检索无时间限制。对检索到的文献进行筛选,最终选取27篇文章纳入研究。结果:27篇RCT文献中,统计出29种与NSCLC相关的抑癌基因甲基化,其中P16,RASSF1A,APC,RARβ,DAPK,CDH13和RUNX3基因启动子甲基化与NSCLC具有明显相关性,该相关性与吸烟与否、年龄、性别、肿瘤分期和组织学等特征无关。结论:检测外周血抑癌基因P16,RASSF1A,APC,RARβ,DAPK,CDH13和RUNX3基因启动子甲基化状态可作为早期筛查NSCLC的生化标志物。其临床普及需要进一步的大规模、大样本量研究来证实。