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恶性肿瘤的增殖从生物学角度看主要表现在两个方面:一方面是肿瘤细胞的“不灭性”;另一方面是细胞分裂的失控。参与细胞周期调控的分子有:细胞周期蛋白(cyclin),细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CKI)。CKI是近年来新发现的一类重要的细胞周期调控蛋白,它能和CDKs、cyclins以及cyclin—CDKs复合物结合,抑制CDK的活性。CKI分为CIP/KIP和Ink4两个家族,p27是CIP/KIP家族中的一员,在细胞周期调控中所起的作用已引起广泛的关注。p27可与cyclinE-CDK2复合物结合并抑制其对底物的磷酸化作用,cyclin E-CDK2是p27的主要调节对象。cyclin E是CDK2的调节亚基,调节着CDK2的活性。cyclin E在多种肿瘤中有基因扩增及过表达,己经被证实是一种癌基因。本实验应用RT-PCR、免疫蛋白印迹杂交(Western blot)及免疫组化(S-P)方法检测71例膀胱癌患者和20例正常膀胱组织中p27和cyclinE基因mRNA及蛋白表达情况,以期探讨p27和cyclinE基因与膀胱癌的关系。 第一部分:膀胱癌中P27基因和蛋白的表达研究 本实验应用RT-PCR、Western blot及免疫组化(S-P)方法检测71例膀胱癌患者和20例正常膀胱组织中p27mRNA及蛋白表达情况,以期探讨p27基因与膀胱癌的关系。 实验材料与方法 1实验材料 本研究应用71例膀胱癌和20例正常膀胱组织作为研究材料,标本来源于住院手术患者。 2.主要试剂