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目的研究绿原酸(chlorogenic acid，CHA)对淀粉样β蛋白25-35（β-amyloid,Aβ25-35）激活巨噬细胞导致大脑皮层细胞损伤的保护作用机制。方法采用生后0-3d左右的Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠，取出大脑皮层细胞然后做体外培养。培养8d后与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养2d，再加入10μmol/LAβ25-35制作阿尔茨海默病细胞模型。这个实验分为单独培养组、共同培养组、单独培养Aβ组、共同培养Aβ组和共同培养CHA组分别作用0.5h、1h、2h、4h、6h后检测各组的结果。细胞损伤程度通过观察细胞形态和记数判定。p38分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、热休克转录因子（HSP27）、有丝裂原激活蛋白激酶活化的蛋白激酶-2（MAPKAPK2)以及有丝分裂原激活蛋白激酶激酶3/6(MKK3/6)，还有活化转录因子2（ATF-2）等五种p38MAPK通路蛋白的磷酸化表达水平通过Western blot来进行检测。通过免疫荧光和免疫组化染色观察微管相关蛋白-2（MAP-2）的表达。结果CHA显著抑制Aβ25-35处理所致的神经元密度的减少并且改善细胞的形态。加入Aβ25-35（10mol/L）到共同培养的大脑皮层细胞和巨噬细胞，0.5h、1h、2h、4h、6h后，Western blot检测ATF-2、HSP27、p38MAPK、MAPKAPK-2和MKK3/6五种通道蛋白磷酸化的表达水平，从检测的结果可以看出Aβ25-35可以使ATF-2，MKK3/6和p38MAPK的磷酸水平明显增加，在2h的时候磷酸化水平达到最高峰，4h后就逐渐下降，在共同培养2h后检测到p38MAPK磷酸化值由空白组是0.35pg/ml，Aβ组增加到1.2117pg/m（lp<0.05），CHA组下降到0.7894pg/ml（p<0.05）；MKK3/6的磷酸化值由空白组是0.63pg/ml，Aβ组增加到1.71pg/ml（p<0.05），CHA组下降到1.3pg/ml（p<0.01）；ATF-2的磷酸化值由空白组是0.38pg/ml，Aβ组增加到1.41pg/m（lp<0.05），CHA组下降到1.08pg/ml（p<0.01）；MAPKAPK-2的磷酸化值由空白组是1.034pg/ml，Aβ组下降到0.3243pg/ml（p<0.05），CHA组增加到0.45pg/ml（p<0.01）。HSP27的磷酸化值由空白组是1.68pg/ml，Aβ组下降到0.81pg/ml（p<0.05），CHA组增加到1.2pg/ml（p<0.01）。另外，在巨噬细胞和大脑皮层细胞联合培养6h后做免疫组化检测发现，Aβ25-35组与空白对照组相比，MAP-2表达阳性的神经元数目明显减少，CHA治疗组中MAP-2表达阳性的神经元数量明显增加，这些结果显示CHA对Aβ25-35激活巨噬细胞导致大脑皮层细胞损伤具有很好的保护作用，这种保护作用机制是通过p38MAPK这个信号通路来实现的。结论1.CHA对Aβ25-35激活小鼠巨噬细胞导致大脑皮层细胞损伤起到了很好的保护作用。2.绿原酸通过抑制Aβ25-35诱导巨噬细胞释放炎症因子激活的p38MAPK信号转导通路，从而可以起到保护神经细胞的作用。