【摘 要】
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为研究黄鳝精巢的周年变化规律和精子生成过程中相关基因表达情况,本文采用常规石蜡组织切片法观察了成都及周边地区3周年黄鳝精巢的发育情况,检测了黄鳝不同发育时期精巢中bcas2、dmc1、spo11和rec8的表达情况,并采用免疫组织化学法定位了黄鳝Dmc1蛋白的位置。主要研究结果如下:1.2015年4月至2018年3月采集的1627尾黄鳝中,共有雄性样本454个。雄性个体平均体长38.53±5.46
【基金项目】
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国家自然科学基金（31402286）；
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为研究黄鳝精巢的周年变化规律和精子生成过程中相关基因表达情况,本文采用常规石蜡组织切片法观察了成都及周边地区3周年黄鳝精巢的发育情况,检测了黄鳝不同发育时期精巢中bcas2、dmc1、spo11和rec8的表达情况,并采用免疫组织化学法定位了黄鳝Dmc1蛋白的位置。主要研究结果如下:1.2015年4月至2018年3月采集的1627尾黄鳝中,共有雄性样本454个。雄性个体平均体长38.53±5.46 cm（20.50～57.63 cm）,平均体重50.70±24.07 g（17.70～143.30 g）。体长主要分布在30.00～44.90 cm,体重主要分布在20.00～49.90g。样本总雄性率为27.90%,高峰期出现在3～4月、7～9月和11～12月。雄性率夏季明显高于冬季（P＜0.05）,呈现明显的季节性变化规律。性体指数在0.18%～1.31%间波动,2个高峰期出现在每年4月和9月,结合组织学观察,确定其繁殖高峰期在每年的5月份。由此可以看出,成都及周边地区黄鳝的繁殖期在每年的4月和9月,繁殖高峰期在每年的5月份,雄性个体的发育具有季节变化规律。2.运用实时荧光定量PCR技术检测了黄鳝bcas2、dmc1、spo11和rec8在不同发育时期精巢的表达情况。结果表明,4个基因的表达趋势基本一致,在Ⅲ期精巢中的相对表达量均显著高于Ⅱ期和Ⅵ期（P＜0.05）,其它各发育时期间表达量差异不显著（P＞0.05）。这提示我们,bcas2、dmc1、spo11和rec8基因在黄鳝精巢发育过程中扮演了重要角色。3.免疫印迹结果显示,Ⅲ期精巢中能检测到Dmc1的阳性信号。免疫组化结果发现,Dmc1的阳性信号仅位于初级精母细胞。结果表明,Dmc1蛋白可能在黄鳝精母细胞发育过程中扮演着重要的角色。
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