实验目的:G蛋白偶联受体Mrgpr D特异性表达于背根神经节的小直径感觉神经元中,但在肠道组织是否表达尚不清楚。近年来,我国肠道炎症疾病患者的数量大幅上升,其中炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease,IBD）是最主要的形式。IBD的临床表现主要为腹泻、腹痛甚至便血。目前认为IBD是肠道黏膜免疫异常所导致的炎症反应,但其病因和发病机制仍不够明确,因而临床缺乏行之有效的治疗手段。因此,深入探讨IBD致病机制并从中鉴定新的药物作用靶点是目前科学研究和临床治疗的迫切需求。本论文目的为分析Mrgpr D在肠道中的表达模式,并进一步探讨该受体是否与IBD有关。实验方法:利用免疫荧光技术分析Mrgpr D在小鼠肠道中的表达模式,使用免疫荧光和激光共聚焦技术鉴定Mrgpr D表达于何种细胞类型。通过给小鼠饮用葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium,DSS）的方法建立IBD动物模型,利用临床评分、组织学染色、免疫荧光、实时定量荧光PCR、ELISA等方法比较野生型（Wild Type,WT）小鼠和Mrgprd基因敲除(Mrgprd-/-)小鼠肠道炎症的强弱,探讨Mrgpr D是否参与DSS诱导的IBD。最后,利用免疫细胞系,分析Mrgpr D调节细菌脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的炎症反应的信号转导机制。实验结果:我们发现,Mrgpr D大量表达于小鼠肠道的肌肉层和黏膜固有层,具体细胞类型有:肠道平滑肌细胞、固有层巨噬细胞和CD3阳性的T淋巴细胞。此外,Mrgpr D也表达于小鼠腹腔巨噬细胞和脾脏中的CD3阳性T淋巴细胞。利用DSS建立小鼠IBD模型,与正常饮水的对照组相比,DSS处理组小鼠结肠组织中Mrgpr D表达水平显著增加。通过比较Mrgprd-/-小鼠和WT小鼠,我们发现DSS处理诱导的结肠炎症反应在Mrgprd-/-小鼠中显著弱于WT小鼠。以上结果提示,Mrgpr D与DSS诱导的肠炎紧密相关。进一步利用免疫细胞系RAW 264.7和Jurkat细胞,研究发现,Mrgpr D的激动剂处理后显著增强NF-κB信号通路的激活,该作用可能是通过Mrgpr D与TAK1相互结合而实现的。最后,尾静脉注射Mrgpr D拮抗剂D-Pro~7-Ang-（1-7）可以有效缓解DSS诱导的小鼠结肠炎。本研究首次揭示了Mrgpr D在肠道中的表达模式,以及Mrgpr D通过促进NF-κB介导的炎症反应加剧肠道炎症的作用机制。我们认为,Mrgpr D可作为抑制肠道炎症反应的药物作用靶点,为临床治疗IBD提供新思路。