胶体金免疫层析技术是以胶体金作为示踪标记物,基于抗原抗体特异性结合的一类快速检测技术,具有操作方便、检测快速、标记物稳定、成本低、对检测人员要求不高等优点,广泛应用于医疗诊断、食品安全、环境监测等领域的定性和定量检测。胶体金免疫层析技术的载体以硝酸纤维素膜(NC)为主,但由于其生产工艺复杂很难控制产品的结构差异；膜孔径、样品体系、点样环境(温度、湿度)、封闭情况、储存条件等均对蛋白质与膜的结合产生影响；另外硝酸纤维素膜的材质较脆在操作过程中易碎、易折和产生划痕等,因此检测过程中易出现拖带、显色不均匀的现象致使免疫层析技术的灵敏度、稳定性受到影响,检测成本降低的空间较小。因此建立一种基底材质稳定、成本低廉、便于操作的免疫层析快速检测方法为目前研究的热点。本文采用廉价易得、表面均一光滑、透光性好、耐高温、耐高离子强度清洗的玻璃材质作为载体,建立了一种以玻璃毛细管为基底,以胶体金为标记示踪物,利用抗原抗体的特异性结合实现对目标物的检测的新技术,并对其检测性能进行了分析,将免疫层析技术成功的转移至毛细管中进行,命名为胶体金免疫层析毛细管(capillary immunochromatographic assay CICA)。论文的主要研究结果如下：本论文首先利用柠檬酸钠还原法制备了3种不同粒径的胶体金粒子,在最优条件下制备了胶体金标记抗体复合物。最终根据胶体金标记抗体复合物的稳定性、抗原结合能力选择13nm的胶体金粒子标记抗体制备免疫检测探针用于后续的实验。对清洗活化后的玻璃毛细管使用γ-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷(GPTMS)进行修饰,将包被原和二抗共价结合在毛细管的特定位置作为检测区和质控区,组装了新型的用于小清蛋白快速检测的免疫层析毛细管。对毛细管的修饰时间和检测条件进行了优化,利用最优条件下制备的免疫层析毛细管实现对鱼类的主要过敏原小清蛋白的检测,其视觉检测限为70ng mL-1,半定量检测限为40 ng mL-1。对新建方法的检测性能进行分析,并对多种实际样品进行检测,表明免疫层析毛细管具有结构简单、稳定性、重复性和特异性好等优点。为验证新建胶体金免疫层析毛细管的普遍适用性,研究其是否适合用于对灵敏度要求较高,样品基质更复杂的小分子物质的检测。参照免疫竞争的原理将呋喃唑酮代谢物的包被原(AOZ-OVA)和羊抗鼠二抗分别共价固定在修饰后的毛细管的特定区域为检测区和质控区,对毛细管壁的非特异性结合位点封闭后便组装成功了用于呋喃唑酮代谢物快速检测的CICA。对毛细管的修饰方法和检测方法进行了详细的优化,在最优条件下其视觉检测限为0.65 ng mL-1,使用平板扫描仪进行半定量测试其检测限为0.26 ng mL-1,包括样品前处理的整个检测过程在2h内可以完成。该方法呈现出对小分子检测优异的灵敏度、重复性、选择性,并成功用于多种实际样品的检测。以玻璃材质为基底为免疫层析检测方法的再生提供了可能,也是降低生产成本提高检测稳定性、重复性和特异性的有效手段。首先优选出适合免疫层析毛细管的解离液：含1%(v/v)DMSO和5%(w/v)SDS的0.1M甘氨酸-盐酸(pH2.8)缓冲液。对影响再生的条件进行优化,得出最佳的解离条件为：显色后60min内进行解离,解离温度为20℃,解离时间为5min。在最优条件下用于呋喃唑酮代谢物检测的免疫层析毛细管可再生3次,且再生后的灵敏度和稳定性不受影响。玻璃材料具有表面光滑、耐高温、耐高离子强度清洗等优点,但要将蛋白质固定在其表面首先需要经过修饰。本研究探讨了玻璃毛细管表面经过氨基、环氧基、醛基等基团的修饰方法。通过手臂或树枝状大分子修饰的毛细管使固定其上的生物材料分子伸出基底有利于维持空间形态,更易于抗原抗体的结合,使免疫层析毛细管呈现出更优异的稳定性。修饰方法对灵敏度和再生性影响不大。优选出最佳的储存条件为4℃下于PBS液体中储存。本文以玻璃毛细管为基底成功组装了CICA,并对其组建条件进行了详细优化。实现了对水产品中的大分子和灵敏度要求较高的小分子的检测；对再生性能进行了研究,对适宜构建免疫层析毛细管的修饰方法进行探讨。目前建立的免疫层析毛细管方法具有较好的灵敏度、稳定性和重复性,为免疫层析快速检测方法拓宽了思路,为建立高灵敏度、高稳定性的方法奠定了理论和操作基础。