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目的:1.分析山东省55例血友病A（HA）患者基因突变类型,探讨HA发病机制。2.回顾性分析山东省55例HA患者的临床特征、心理状况、生活质量等,并进行轻、中、重型组间比较,评估山东省HA患者生存现状,分析相关影响因素,为提高山东省HA患者的生活质量、进一步开展个体化规范化综合性临床治疗提供帮助。3.探讨临床试验对山东省HA患者心理健康状况及生命质量的影响。研究方法:1.采用LD-PCR（长距离聚合酶链式反应）方法检测山东省55例HA患者凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因的内含子22倒位突变,采用高通量测序法检测内含子22倒位阴性者FⅧ基因的26个外显子,并与人类基因突变数据库比对。2.回顾山东省55例HA患者的病例资料,采用中文版血友病关节健康评估表 2.1（haemophilia joint health score 2.1,HJHS 2.1）、医院焦虑抑郁自评量表（Hospital Anxiety and Depression Scale,HAD）、成年血友病患者生命质量测评问卷（Haemo-QoL-A）评价患者关节、心理健康状况及生命质量,并对其临床特征进行统计学分析。3.选取于济南市中心医院血液科入组药物临床试验的55例HA患者作为实验组,35例未入组药物临床试验的HA成年患者作为对照组,实验组患者在研究期限内如果发生出血事件,将免费接受FⅧ按需治疗,并接受随访,每月随访1次。随访过程中对患者进行血友病知识的强化更新。同时邀请骨关节科、口腔科、心理科多学科医生及护理人员对患者目前状态进行评估与个体化指导等。随访共持续12个月。对照组患者仍使用个体既往治疗方式,接受传统替代治疗,不接受随访。于入组时及入组后第12个月采用HAD和HaemoQoL-A中文版量表分别对实验组及对照组患者的心理状况及生命质量进行评分及统计学分析。结果:1.①内含子22倒位患者有20例（36%）,均为重型表型,未检测到基因突变者6例,余29例共检测到32个（28种）突变类型,其中3例患者同时检测出2种突变。编码区突变中,12例（22%）错义突变,7例（13%）无义突变,6例（11%）剪切突变,4例（7%）缺失突变,3例（5%）插入突变。②内含子22倒位阴性的35例患者中未检测出基因突变的有6例。同一家系的患者具有相同的基因突变类型。对比Pubmed、NCBI、UCSC、Factor Ⅷ Variant Database等数据库,发现9种新的突变类型。运用SIFT、Polyphen-2等生物医学软件评估其致病潜力,其中被预测为致病的有c.20342062del、c.60526058del、c.60466047del,被预测为可能致病的有 c.1009+1G>T、c.2997dupA、c.4001delT,不确定是否致病的为 c.1334T>A、c.1493G>A、c.557A>T。2.①55例HA患者中常居住于济南的有17例（30.91%）,临沂7例（12.73%）,德州5例（9.09%）,聊城5例（9.09%）,滨州4例（7.27%）,菏泽4例（7.27%）,济宁3例（5.45%）,泰安3例（5.45%）,滕州2例（3.64%）,烟台2例（3.64%）,青岛、日照、潍坊各1例（1.82%）②14例（25.45%）为学生,16例（29.09%）为职员（其中11例为不稳定工作）,8例（14.55%）为农民,4例（7.27%）为自由职业者,14例（25.45%）无业。达到我国法定结婚年龄（22周岁）的43例患者中30例（69.77%）未婚育,1例（2.33%）离异,12例（27.91%）已婚（其中7例婚姻状况差）。③重型患者33例（60%）,中间型22例（40%）,无轻型患者。④26例（47.27%）有明确家族史,余29例（52.73%）患者表示无家族史或家族史不详。中型患者中10例（45.45%）家族史阳性,重型患者中17例（51.52%）家族史阳性,两组之间差异无统计学意义（P>0.05）。⑤首次出血年龄与首次确诊年龄相比,差异具有统计学意义（P<0.05）。中型和重型患者首次出血年龄、首次诊断年龄、诊断延误时间差异无统计学意义（P>0.05）。⑥首次出血原因:中型患者自发性出血14例（63.64%）,外伤性出血8例（36.36%）,重型患者自发性出血27例（81.82%）,外伤性出血6例（18.18%）。中型组与重型组首次出血原因比较差异不具有显著性（P>0.05）。首次出血表现:55例HA患者首次发病出血表现频率依次为:关节出血（60%）、皮肤黏膜出血（30.9%）、牙龈出血（3.6%）,肌肉、内脏、颅内出血最少,各占1.8%。中型与重型分组患者首次发病出血表现之间差异不具有显著性（P>0.05）。首次出血程度.:中型患者中轻度出血8例（36.36%）,中度出血13例（59.09%）,重度出血1例（4.55%）。重型患者中轻度出血11例（33.33%）,中度出血21例（63.64%）,重度出血1例（3.03%）。中型与重型患者在出血程度上差异不具有显著性（P>0.05）。⑦中型组关节评分平均为23.68分,重型组关节评分平均为23.33分。两组HJHS2.1评分之间差异不存在统计学意义（P>0.05）。⑧55例HA患者中,13例（23.64%）仅在严重出血时治疗,42例（76.36%）进行按需治疗,无进行预防治疗的患者。3例有手术史,其中2例行双膝关节置换术,1例行膝关节滑膜切除术。39例（70.91%）既往输注冷沉淀、血浆或全血治疗。⑨55例HA患者中,中型组A量表平均分8.86分,重型组A量表平均分9.61分;中型组D量表评分8.96分,重型组D量表评分9.64分。两组A量表和D量表评分差异均无统计学意义（P>0.05）。⑩中型组患者平均分95.64分,重型患者平均分101.30分,两组Haemo-Qo L-A评分差异无统计学意义（P>0.05）。3.实验组患者中12例失访,对照组患者中3例失访,失访患者不列入统计范围。实验组与对照组患者在年龄构成比,中、重型占比方面差异均无统计学意义（P>0.05）。两组患者HAD及Haemo-QoL-A中文版量表的首次评分比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;实验组各量表末次与首次评分分别比较,差异有统计学意义（P<0.05）,对照组各量表末次与首次评分分别比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1.①本研究对山东省55例患者FⅧ基因进行内含子22倒位检测和全外显子二代测序,证实内含子22倒位通常导致重型表型,编码区突变最常见的突变类型为错义突变。②发现9种新突变类型,分别为c.20342062del、c.60526058del、c.60466047del、c.1009+1G>T、c.2997dupA、c.4001delT、c.1334T>A、c.1493G>A、c.557A>T。其丰富了人类FⅧ基因突变数据库,进一步阐明了血友病A的分子发病机制,为同一家族中的携带者和产前诊断提供依据。2.①患者就诊率取决于就诊距离及就诊的便利性。患者普遍存在诊断延迟现象。中型HA与重型HA患者的诊断情况无差异。②HA患者首次出血多为自发性,其次为外伤性;首次出血表现以关节出血最多见;是否有明确家族史与临床表型无关;中型HA患者与重型HA患者首次出血原因、表现及程度,关节情况无差异。③HA患者未达到预防治疗、康复等综合治疗的目标。④HA患者婚姻及就业情况不乐观,普遍存在焦虑及抑郁状态,生命质量仍处于中下水平,中型与重型HA患者心理状况、生存质量无差异。3.临床试验能有效改善患者心理健康状况及生命质量。参加药物临床试验能使患者接受及时且充分的按需治疗。免费试用凝血因子也在一定程度上缓解了患者经济压力。同时参加药物临床试验有多学科专家参与,对患者进行定期随访,保证了综合关怀的实施,并且可以根据患者病情动态变化及时调整治疗方案。以上保证了药物临床试验对患者心理状况及生命质量的改善。