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橡胶粉孢(Oidiumheveae B A. Steinmann,简称OH)是橡胶树白粉病的病原菌,其引致橡胶树大量落叶而严重降低胶乳产量。迄今普遍认为OH是专性寄生菌,只能在橡胶树幼嫩组织上长期存活和完成其生活史。长期以来,OH研究所需的菌源材料,只能从高大的橡胶树树体上获取,工作效率受到严重限制。且橡胶树遗传转化技术一直未能突破,橡胶树-OH互作分子生物学研究无法开展。因此,寻找方便操作的其他OH寄主,是OH生物学、致病分子生物学研究的瓶颈。本研究通过细胞组织学观察和PCR验证,证明了 OH能正常侵染拟南芥突变体eds1,并在eds1上完成病害循环。主要研究结果如下:1、将OH孢子接种到野生型拟南芥Col-O、突变体eds1和Sr1-4D、热研7-33-97橡胶树叶片上,显微观察OH的分生孢子萌发和附着胞形成情况。结果发现:OH分生孢子能在三种拟南芥叶片上正常萌发和形成附着胞,但在4种植物叶片上的分生孢子萌发率和附着胞数量有显著差异,从高到低依次为热研7-33-97、eds1、Co1-0和Sr1-4D。据此推测,OH的分生孢子萌发和附着胞形成并未遭遇参试植物的抵抗系统。2、显微观察OH在拟南芥叶片形成附着胞后的侵染、发育和繁殖情况。结果表明,接种OH后第24小时,eds1叶片上开始出现吸器,第5天形成网状菌丝体,第12天出现大量分生孢子梗,第6天出现与橡胶树白粉病表现相同的白色粉状物。之后随着时间的延长,白粉病症状越来越典型,至接种后第37天,叶片组织逐渐皱缩畸形,叶面布满白色粉状物。经镜检,eds1叶片上的粉状物为与OH形态相同的分生孢子,吸器形态与OH在橡胶树上的吸器形态一致。然而,接种OH到Col-0和Sr1-4D叶片上后的第6天及之后,只发现极少量的次生菌丝和极少量的分生孢子梗,一直未观察到吸器和分生孢子。其研究结果表明,突变体eds1已经丧失、而Col-0和Sr1-4D尚没有丧失对OH的非寄主抗性。3、将拟南芥突变体eds1叶片的白粉菌接种到橡胶树品系热研7-33-97盆钵橡胶树小苗的叶片上。接种后第5天,橡胶叶片开始出现白粉病病斑,第12天出现典型的橡胶树白粉病症状。经镜检,病斑上的粉状物为与OH形态相同的菌丝体、分生孢子梗和分生孢子。表明eds1叶片的白粉菌能成功感染橡胶树。4、以rDNA-ITS序列通用引物对ITS5/IST6为引物,以接种OH分生孢子的拟南芥突变体eds1叶片上显症病斑上白粉状物的基因组DNA为模板,进行PCR扩增。结果显示,病斑上的白粉状物的rDNA-ITS序列与OH无差异。进一步以OH的12732、18993和9493致病相关基因为靶标,进行PCR验证。结果显示,来自拟南芥突变体eds1叶片上的白粉菌,其12732、18993和9493致病相关基因序列与OH的相似度均达到或超过99%。表明引致eds1叶片白粉病症状的白粉菌确实是OH。OH能侵染拟南芥突变体eds1并完成生活史的证实,对研发简便的OH大量繁殖技术、窥探橡胶树-OH的互作关系以及OH的致病分子生物学研究,具有实际应用价值和理论指导意义。