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香菇为药食两用真菌,含有多种药用成分,特别是其中的香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节和抗氧化等功能。香菇多糖作为一种免疫调节剂,因其毒副作用小、疗效好,具有重要的开发和研究的价值。本实验以房县小冬菇（香菇属）为原料,采用碱提工艺提取粗多糖,再经双氧水脱色、超滤分级分离得到两个均一分子量的多糖组分,分别命名为LNT1和LNT2,并对其结构、糖链构象及体外抗肿瘤活性等方面进行了研究,为其进一步的开发利用打下基础。以房县小冬菇为原料,采用碱提工艺提取粗多糖,通过正交实验确定碱提工艺的最佳条件:提取温度为25℃,NaOH浓度为5%,提取时间为24 h。香菇粗多糖再经双氧水脱色、超滤分级分离得到两个精制香菇多糖组分LNT1和LNT2。经高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测得LNT1和LNT2的重均分子量（Mw）分别为605.4 kDa、185.2 kDa;苯酚-硫酸法测得LNT1和LNT2的糖含量分别为95.61%和94.99%;旋光度实验测得LNT1和LNT2的比旋光度（[α]20℃D）分别为+8.30°和+8.77°;紫外扫描实验表明LNT1和LNT2不含蛋白质和核酸;经糖含量和旋光度测定以及凝胶渗透色谱和紫外扫描证实,本实验得到的精制香菇多糖LNT1和LNT2为分子量均一且纯度较高的多糖组分,可以进行下一步的结构研究。综合运用酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化等化学分析法和傅里叶红外光谱、核磁共振光谱等光谱分析法对LNT1和LNT2的化学结构进行分析;通过刚果红实验对LNT1和LNT2的糖链构象进行考察。酸水解实验结果表明LNT1和LNT2仅由D-葡萄糖组成;高碘酸氧化和Smith降解实验结果表明LNT1和LNT2含有（1-3）或（1-3-6）、（1-6）或末端连接类型的糖残基,各连接类型糖残基的分子摩尔比分别为:2.73:1和2.91:1;甲基化实验结果表明LNT1和LNT2主要含有末端、（1-3）、（1-3-6）连接类型的糖残基,各连接类型糖残基的分子摩尔比分别为:1.07:1.56:1.00和1.00:1.70:1.08;傅里叶红外光谱（FT-IR）分析表明LNT1和LNT2含有典型的多糖特征吸收峰,且为β构型的D-吡喃糖;核磁共振实验结果表明LNT1和LNT2为β构型的葡聚糖,其主链由1,3-连接的葡聚糖组成,分支点位于6位,侧链由末端葡萄糖残基组成。刚果红实验表明LNT1和LNT2是三股螺旋结构的多糖,随着NaOH浓度的增大,糖链构象由三股螺旋逐渐解旋为无规则线团。综上所述,LNT1和LNT2是以β-（1-3）-D葡萄糖为主链,6位上带有支链的葡聚糖,平均每4个葡萄糖残基组成的重复单元含有一个分支。基本结构单元为:采用四甲偶氮唑盐（MTT）比色法测定LNT1和LNT2对鼠肝腹水瘤H-22细胞增殖的抑制率。实验结果表明LNT1和LNT2均能显著抑制鼠肝腹水瘤H-22细胞的增殖,且随着多糖浓度的递增多糖对鼠肝腹水瘤H-22细胞的抑制率逐渐增加,当多糖浓度为800μg/mL时,抑制率达到最高,分别为52.31%、52.62%,且多糖的浓度与多糖对鼠肝腹水瘤H-22细胞的抑制率之间呈量效依赖性,因此香菇多糖LNT1和LNT2具有进一步研究的价值。