论文部分内容阅读
从盐藻培养液中提取出胞外多糖，并较为系统地研究了环境因素对盐藻生长及其胞外多糖分泌量的影响。在发现盐藻胞外多糖的抗氧化、促进益生菌生长等生物药理活性后，对盐藻胞外多糖复合物进行了分离纯化，研究了分离所得的两个多糖组分的部分理化性质和初步结构。采用超滤浓缩后无水乙醇沉淀法来提取盐藻胞外多糖复合物，通过苯酚-硫酸法测定其糖含量，并利用单因子试验法和正交试验法分别考察了培养时间、培养基中几种营养盐（NaCl、KNO3和KH2PO4）浓度和pH值等环境因素对盐藻生长及其胞外多糖分泌量的影响。结果表明，在一定范围内，随着营养盐浓度的提高和pH值的增大，盐藻生长量逐渐升高，但是其胞外多糖分泌量表现出先增大后减少的现象，当NaCl=0.8mol／L、KNO3=800mg／L、KH2PO4=5mg／L和pH=8.5时，胞外多糖的分泌量最大，可高达489mg／L。利用NBT光还原法和甲基紫光度法分别考察了盐藻胞外多糖体外抗氧化活性，结果表明，胞外多糖对超氧阴离子自由基（O2-·）没有抗性，对Fenton体系中产生的羟自由基（·OH）有较好的抑制作用。从药物培菲康和酸奶中分离到乳酸菌属的有益菌种，在其扩大培养过程中用过滤灭菌的盐藻胞外多糖溶液处理，确定了盐藻胞外多糖能促进益生菌的体外增殖和存活，且效果较显著。经丙酮及无水乙醚洗涤脱脂和双酶解除蛋白初步纯化后，用DEAE-52阴离子交换柱层析分离纯化盐藻胞外多糖复合物，得到了两个多糖组分EPSⅠ和EPSⅡ，琼脂糖凝胶电泳鉴定各自为均一的成分。对EPSⅠ和EPSⅡ进行定性定量分析，结果糖含量以葡聚糖为对照时分别为61.34％和52.81％，蛋白含量3.97％和1.35％，且核酸含量小于0.025％，达到了比较高的纯度。利用薄层层析和气相色谱分析各组分的单糖组成，得到EPSⅠ由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等六种中性多糖和半乳糖醛酸组成，EPSⅡ由鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖等四种中性多糖和半乳糖醛酸组成。并对其进行紫外、红外光谱分析，结果证实EPSⅠ和EPSⅡ为糖类物质，且含α-糖苷键，不含β-糖苷键。