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目的：体外试验：研究庆大霉素、奈替米星对体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2）的毒性作用，及急性肾损伤标志物表达与分泌的特点。体内试验：研究庆大霉素诱导的SD大鼠急性肾损伤模型中血液、尿液生物标志物表达与分泌的特点。通过以上方法的建立，并对上市药进行评价验证，建立对新化合物的肾毒性评价体系，对创新药研发早期的毒性评价提供科学依据。方法：体外试验：采用不同浓度的庆大霉素和奈替米星作用于体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2），通过MTT法检测药物对HK-2细胞的增值抑制作用、ELISA法检测细胞上清液中KIM-1和NGAL的分泌与表达。体内试验：采用连续7天给予庆大霉素（设50mg/kg和100mg/kg两个剂量组），建立SD大鼠的急性肾损伤模型，同时设正常对照组（给予等体积的0.9%NaCl注射液）。利用全自动生化分析仪测定血清中肌酐（CRE）和尿素（UREA）的浓度，ELISA法检测血液中Cys C、β2-MG、NGAL和尿液中的KIM-1、NGAL、IL-18、Cys C、β2-MG的分泌与表达。结果：体外试验：庆大霉素和奈替米星对体外培养的HK-2细胞均具有增殖抑制作用，其IC50分别为2.473±0.058mg/ml和5.277±0.125mg/ml；在HK-2细胞发生损伤后的短时间内，细胞上清液中KIM-1和NGAL的浓度会显著升高，不同的是KIM-1的浓度升高后会渐渐下降，而NGAL的浓度会维持在较高水平。体内试验：1、肾脏组织病理学检查显示，在给予庆大霉素后的第2天，50mg/kg组、100mg/kg组肾脏无明显病理变化，第4天，50mg/kg组可见少量上皮细胞受损，100mg/kg组比50mg/kg组受损严重，第8天，50mg/kg组上皮细胞受损比较严重，100mg/kg组大量上皮细胞严重受损。2、在给予庆大霉素后的第8天，100mg/kg组血清中肌酐、尿素、β2-MG的浓度与0.9%NaCl组（正常对照组）相比，差异具有统计学意义（P＜0.05）；但两个模型组血清中NGAL和Cys C的浓度与0.9%NaCl组（正常对照组）相比，差异不具有统计学意义（P＞0.05）；但从给予庆大霉素后的第4天开始，100mg/kg组尿液中KIM-1、NGAL、IL-18、Cys C、β2-MG的含量与0.9%NaCl组（正常对照组）相比，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论：体外试验表明，庆大霉素和奈替米星对体外培养的HK-2细胞均具有增殖抑制作用，且能够引起KIM-1和NGAL的异常表达和分泌。体内试验表明，与血清肌酐、尿素和组织病理学检查相比，尿液中KIM-1、NGAL、IL-18、Cys C、β2-MG含量的变化能更早预测庆大霉素引起的肾损伤。