论文部分内容阅读
第一部分：文献综述IgA肾病的中医研究进展第二部分：临床研究加味黄芪赤风汤治疗IgA肾病蛋白尿的单病例随机对照研究目的：观察加味黄芪赤风汤治疗IgA肾病的安全性和有效性。方法：按照本实验的要求严格纳入病例,采用单病例随机对照设计,每个病例的研究共分3轮,每轮2期,即治疗期和对照期,每期4周,每一轮按随机数字表随机分组,决定治疗方案,在常规基础治疗的基础上,治疗期采用加味黄芪赤风汤及替米沙坦治疗,对照期采用替米沙坦治疗,疗效指标为患者的主要症状积分和24小时尿蛋白定量,安全性指标为肝肾功能、血常规。患者每天记录症状积分,每期实验前和实验后均记录实验室指标。结果：5例患者中医症状积分在每轮都有不同程度的改善,其中患者2、患者5在第一轮的治疗中仅有部分改善,其余全部改善(P<0.05)；将中医症状积分合并后,则5例患者治疗期与对照期相比,全部改善(P<0.05)。5例患者每轮治疗期与对照期相比,24小时尿蛋白定量均减少(P<0.05)。5例患者全部三轮治疗期与对照期临床症状积分和24小时尿蛋白定量数据合并后,显示差异有统计学意义(P<0.05),治疗期均好于对照期。在全部病例中,未出现任何不良反应。结论：加味黄芪赤风汤治疗IgA肾病是安全有效的,单病例随机对照应用于IgA肾病是可行的。第三部分：实验研究加味黄芪赤风汤对LPS诱导的小鼠系膜细胞过度增殖及细胞外基质过度生成的影响目的：研究加味黄芪赤风汤对脂多糖(LPS)刺激的肾小球系膜细胞(GMC)增殖,细胞上清液中层粘连蛋白(LN)、Ⅳ胶原纤维(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)的表达以及对细胞周期的影响,探讨其在治疗IgA肾病、防治肾脏纤维化中的意义。方法：加味黄芪赤风汤及替米沙坦大鼠灌胃后,制备含药血清,用含10%含药血清的DMEM培养液体外培养GMC, LPS作为刺激因子,将细胞分为空白组、LPS组、替米沙坦组、加味黄芪赤风汤高、中、低剂量组；①采用CCK-8法、MTT法检测含药血清对GMC的毒性作用,并动态观察在各种处理因素的作用下,GMC的增殖情况。②采用酶联免疫法吸附试验(ELISA)测定体外培养的GMC在各种处理因素的作用下,细胞外基质(ECM)即：LN、Col-Ⅳ、 FN的分泌情况。③流式细胞仪检测细胞周期。结果：与正常组相比,各含药血清对GMC无毒性作用(P>0.05)；LPS能刺激体外培养的GMC增殖,0.625-80μg/ml LPS组与正常组相比,细胞增殖有统计学意义(P<0.05)：加味黄芪赤风汤组在24、48、72小时对LPS刺激的GMC增殖都有抑制作用,且24小时各组抑制率最高；在某个固定的时间点中药各组抑制率相比,中倍组与高倍组无统计学差异,中倍组与低倍组相比有统计学差异(P<0.05)；高、中剂量加味黄芪赤风汤可阻滞细胞周期,使G0/G1期细胞百分比增多,S期细胞百分比减少,且其差异与模型组相比具有统计学意义(P<0.05)；在对ECM的影响中,72小时时较模型组相比,加味黄芪赤风汤高剂量组中Col-Ⅳ、FN的含量明显减少(P<0.01),而LN含量变化不明显；中剂量组中Col-Ⅳ、FN、LN的含量均明显减少(P<0.01)；低剂量组仅有FN含量减少(P<0.01),而Col-Ⅳ、LN含量变化不明显。结论：LPS能促进GMC增殖；加味黄芪赤风汤能显著抑制LPS刺激下GMC的增殖,使系膜细胞阻滞于G0/G1期,且可以减少ECM的分泌,说明GMC是加味黄芪赤风汤发挥治疗作用、预防肾脏纤维化作用的重要靶细胞；加味黄芪赤风汤以一定的剂量及时间依赖关系抑制GMC的增殖,说明我们临床用药时间和用药剂量是合理的,并且长期服药是安全有效的。