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研究目的:1.验证ALKBH5在多发性骨髓瘤中的表达;2.探究ALKBH5是否调控lncRNA SNHG15的表达水平;3.研究ALKBH5是否通过lncRNA SNHG15调控多发性骨髓瘤的生物学功能。研究方法:1.临床资料（1）收集多发性骨髓瘤患者的骨髓样本10例,磁珠分选出CD138+的MM细胞。同时收集正常对照（Normal control）的骨髓样本5例,磁珠分选出CD138+的原代细胞;（2）RT-qPCR实验检测样本中ALKBH5的mRNA表达水平,Western Blot实验检测样本中ALKBH5的蛋白表达水平;（3）RT-qPCR实验检测样本中lncRNA SNHG15的表达水平,比较ALKBH5 mRNA和lncRNA SNHG15表达水平的相关性。2.体外实验（1）RT-qPCR实验检测多发性骨髓瘤细胞系（NCI-H929、RPMI-8226、ARH-77、U266）中ALKBH5的mRNA表达水平,Western Blot实验检测ALKBH5的蛋白表达水平;（2）体外设计合成LV-ALKBH5-RNAi、LV-ALKBH5-OE及其对照慢病毒,转染MM RPMI-8226细胞系（以下简称8226）,以下调、上调ALKBH5的表达水平,标记为 ALKBH5-组和 Control 组、ALKBH5+组和 Control 组;（3）利用MeRIP-seq技术,从ALKBH5-组、Control组和正常对照组（Normal control）三组细胞中筛选出ALKBH5调控的下游lncRNA,并利用RT-qPCR实验检测候选lncRNA在8226细胞中的表达;（4）RT-qPCR 实验检测lncRNA SNHG15 在 ALKBH5-组和 Control 组、ALKBH5+组和Control组中的表达,验证ALKBH5正向调控lncRNASNHG15的表达;（5）RT-qPCR实验检测多发性骨髓瘤细胞系（NCI-H929、RPMI-8226、ARH-77、U266）中lncRNASNHG15的表达水平;（6）体外设计合成LV-lncRNASNHG15-OE和对照慢病毒,转染ALKBH5-8226细胞和 Control 8226 细胞,构建 ALKBH5-SNHG15+组、ALKBH5-SNHG15NC 组和 ALKBH5NC SNHG15NC 组 8226 细胞,探究 ALKBH5 通过调控 lncRNA SNHG15表达对多发性骨髓瘤生物学功能的影响:1)RT-qPCR实验验证各组细胞中lncRNA SNHG15的表达变化;2)CCK8检测各组细胞增殖差异;3)AnnexinV PE/7AAD双染法流式细胞术检测各组细胞凋亡差异;4)Transwell实验检测各组细胞迁移差异。研究结果:1.RT-qPCR、Western Blot实验结果显示,多发性骨髓瘤患者骨髓CD138+细胞中的ALKBH5 mRNA和蛋白表达水平显著高于正常对照骨髓CD138+细胞,且ALKBH5在多发性骨髓瘤细胞系NCI-H929、RPMI8226、U266和ARH-77中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常对照;2.RT-qPCR、Western Blot 实验结果显示,ALKBH5-组细胞中 ALKBH5 mRNA和蛋白表达水平相对于Control组显著下降,ALKBH5+组细胞中ALKBH5 mRNA和蛋白表达水平相对于Control组显著增加;3.MeRIP-seq筛选出10个下游lncRNA,其中lncRNA SNHG15在骨髓瘤RPMI-8226细胞中表达显著高于正常对照,选定该分子进行后续研究;4.RT-qPCR实验结果显示,lncRNA SNHG15在多发性骨髓瘤患者骨髓CD138+细胞中和骨髓瘤细胞系中的表达均显著高于正常对照,且临床样本中lncRNA SNHG15表达与ALKBH5 mRNA表达正相关;5.RT-qPCR实验进一步验证,ALKBH5-组细胞中,lncRNA SNHG15表达较Control组显著减少,而ALKBH5+组细胞中,lncRNA SNHG15表达较Control组组增加;6.RT-qPCR 实验检测ALKBH5-SNHG15+组、ALKBH5-SNHG15NC组和ALKBH5NC SNHG15NC组8226细胞中lncRNA SNHG15表达水平,结果显示,ALKBH5-SNHG15NC 组细胞中 lncRNA SNHG15 表达水平较 ALKBH5NC SNHG15NC组显著减少;而ALKBH5-SNHG15+组细胞中lncRNA SNHG15表达水平较ALKBH5-SNHG15NC组显著增加;7.CCK8结果显示,ALKBH5-SNHG15NC组细胞增殖活力显著低于ALKBH5NC SNHG15NC 组,而 ALKBH5-SNHG15+组细胞增殖活力显著高于ALKBH5-SNHG15NC 组;8.AnnexinV PE/7AAD双染法流式细胞术结果显示,ALKBH5-SNHG15NC组细胞凋亡率显著高于ALKBH5NC SNHG15NC组,而ALKBH5-SNHG15+组细胞凋亡率显著低于ALKBH5-SNHG15NC 8226细胞;9.Transwell实验结果显示,ALKBH5-SNHG15NC组细胞迁移能力显著低于ALKBH5NC SNHG15NC组,而ALKBH5-SNHG15+组细胞迁移能力显著高于ALKBH5-SNHG15NC 组细胞;研究结论:1.ALKBH5在多发性骨髓瘤患者中和多发性骨髓瘤细胞系中高表达;2.ALKBH5正向调控lncRNASNHG15的表达;3.lncRNA SNHG15在多发性骨髓瘤患者中和多发性骨髓瘤细胞系中高表达,且与ALKBH5 mRNA表达正相关;4.ALKBH5通过lncRNASNHG15体外调控多发性骨髓瘤细胞的增殖、凋亡和迁移,促进多发性骨髓瘤的疾病进展。