百草枯染毒小鼠血清总抗氧化态及甲泼尼龙干预的实验研究

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自十九世纪六十年代以来,百草枯已经成为许多国家广泛使用的除草剂。从七十年代初开始,研究发现百草枯(PQ)对人类和动物具有较强的毒性。百草枯的中毒机制主要是在机体内经过氧化还原过程产生大量的活性氧类物质(ROS),破坏过氧化-抗氧化平衡,引起脂质、蛋白和DNA的氧化损伤,导致细胞、组织功能障碍。虽然在百草枯中毒的患者中广泛应用了甲泼尼龙,但疗效不明确。由于缺乏特效的解毒剂或有效的治疗方法,百草枯中毒患者死亡率高。尽管人们已经意识到氧化应激在百草枯中毒机制中的重要性,但关于百草枯中毒患者体内总抗氧化态的变化及给予大剂量甲泼尼龙治疗的影响等方面的研究非常有限。本研究旨在评估百草枯中毒小鼠的血清总抗氧化态(TAS)变化及大剂量应用甲泼尼龙的作用。实验主要由以下几部分构成:第一部分小鼠腹腔百草枯染毒后血清总抗氧化态变化的研究目的:本部分研究旨在探讨小鼠腹腔注射百草枯对其血清总抗氧化态的影响。方法:小鼠随机分为对照组和百草枯染毒组(PQ组),PQ组小鼠又分别按照50、70、100、150、200和300mg/kg的百草枯染毒剂量分成6组,给予一次性腹腔注射百草枯;PQ组小鼠分别在染毒后1h和3h留取血样,进行血清2,2-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐﹝ABTS﹞自由基清除率的检测,并与对照组比较;每个血样采集点均有5个样本。结果:1、不同染毒剂量组小鼠染毒后1、3h的血清ABTS自由基清除率显著低于对照组小鼠(P<0.05);2、但同一染毒剂量染毒后1、3h测定的血清ABTS自由基清除率无显著性差异(P>0.05);3、小鼠染毒后1、3h的血清ABTS自由基清除率与染毒剂量间无显著相关性。结论:百草枯染毒后小鼠的血清ABTS自由基清除率下降,血清总抗氧化态降低,且染毒后1、3h无显著性差异。第二部分百草枯染毒小鼠早期应用甲泼尼龙对血清总抗氧化态的影响目的:本部分研究旨在评估百草枯染毒小鼠早期应用大剂量甲泼尼龙(medrol)对小鼠血清总抗氧化态的影响。方法:小鼠被随机分成对照组、PQ组、PQ+medrol组和medrol组。PQ组小鼠按照一次性腹腔注射50、70、100、150、200和300mg/kg的百草枯染毒剂量分成6组;PQ+medrol组小鼠在腹腔分别一次性注射百草枯50、70、100、150、200和300mg/kg后即刻注射medrol200mg/kg;medrol组小鼠仅给予腹腔一次性注射medrol200mg/kg;PQ组、PQ+medrol组和medrol组小鼠在染毒后1h和3h取血样,进行血清ABTS自由基清除率的检测,并与对照组比较;每个血样采集点均有5个样本。结果:1、PQ组与PQ+medrol组小鼠1、3h的血清ABTS自由基清除率均显著低于对照组(P<0.05)2、同一染毒剂量的PQ组与PQ+medrol组小鼠同一采血时点测定的血清ABTS自由基清除率比较无显著性差异(P>0.05);3、medrol组小鼠在1、3h血清ABTS自由基清除率与对照组比较无显著性差异(P>0.05);4、PQ+medrol组小鼠1、3h的血清ABTS自由基清除率与染毒剂量间无明显相关性。结论:本实验研究证实了百草枯对机体过氧化-抗氧化平衡的破坏作用,未发现早期大剂量应用甲泼尼龙可以提高染毒小鼠的血清抗氧化态。第三部分甲泼尼龙可能加速急性百草枯中毒小鼠死亡的初步研究目的:本部分研究拟对急性百草枯中毒小鼠进行甲泼尼龙冲击治疗,明确糖皮质激素能否加速急性百草枯中毒小鼠的死亡。方法:小鼠随机分为对照组、染毒组、治疗组和甲泼尼龙对照组。染毒组30只小鼠被随机分为6组,分别一次性腹腔注射50、70、100、150、200和300mg/kg剂量的百草枯;治疗组小鼠30只,在与染毒组相同处理的基础上,百草枯染毒后一次性腹腔注射甲泼尼龙200mg/kg;甲泼尼龙对照组5只小鼠,仅给予一次性腹腔注射甲泼尼龙200mg/kg;观察小鼠的中毒症状,比较染毒组和治疗组小鼠的半数致死量。结果:给予百草枯后的不同时间内,小鼠出现自由活动减少,濒死时呼吸频率增快、张口呼吸、鼻翼扇动等中毒症状。治疗组在染毒后24h、48h和72h的半数致死量均小于染毒组。甲泼尼龙对照组小鼠在观察期内未出现死亡。结论:腹腔注射大剂量甲泼尼龙有可能加速百草枯中毒小鼠的死亡。
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