【摘 要】
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研究表明,许多因素能够影响骨骼肌的生长发育,本研究旨在解决我国黄牛产肉率低、体型小和生长缓慢等问题。畜禽产肉性能由肌肉生长发育所决定,从胚胎期到成年期会受到多个基因的多方面调控,本课题组在前期利用拷贝数变异,对基因进行筛选,选出与肌肉生长发育有关的基因。本试验以此为基础,以DYNC1I2为目的基因,通过实时荧光定量和SPSS关联分析,检测5个黄牛群体的DYNC1I2基因拷贝数变异情况,探究肉牛生长
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金项目（项目编号:31601926）； 国家肉牛牦牛产业技术体系专项（项目编号:CARS-37）； 河南省肉牛产业技术体系（项目编号:S2013-08）； 河南省省级现代农业产业园（项目编号:豫农计划[2019]38）；
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研究表明,许多因素能够影响骨骼肌的生长发育,本研究旨在解决我国黄牛产肉率低、体型小和生长缓慢等问题。畜禽产肉性能由肌肉生长发育所决定,从胚胎期到成年期会受到多个基因的多方面调控,本课题组在前期利用拷贝数变异,对基因进行筛选,选出与肌肉生长发育有关的基因。本试验以此为基础,以DYNC1I2为目的基因,通过实时荧光定量和SPSS关联分析,检测5个黄牛群体的DYNC1I2基因拷贝数变异情况,探究肉牛生长性状和拷贝数变异之间的关联,通过干扰DYNC1I2和构建过表达载体,利用q PCR、Westen Blot、CCK-8、Ed U、免疫荧光等技术探究其在牛成肌细胞增殖分化中的调控作用。此外,主要研究结果如下:1.牛DYNC1I2-CNV影响生长发育性状本研究采集了5个中国黄牛品种（夏南牛、秦川牛、皮南牛、云岭牛和固原黄牛）的血样,共600个样本,除固原黄牛,其他4个品种皆有一个或多个生长性状与拷贝数变异显著相关。在多拷贝个体中,该位点与皮南牛的体长显著相关（P＜0.05）,与云岭牛的胸深显著相关（P＜0.05）;缺失型个体中,该位点与夏南牛的十字部高显著相关（P＜0.05）,与秦川牛的胸宽、腰角宽和坐骨端宽显著相关（P＜0.05）。2.牛DYNC1I2基因促进牛成肌细胞增殖和分化试验通过检测发现,该基因在胎牛时期和成年牛时期的心、肝、肺、肾和肌肉5个组织中均有表达,说明在机体中该基因可能广泛发挥作用,在90日龄胎牛期和24月龄成年牛期这两个时期的表达规律结果则显示,在肌肉组织中胎牛期的表达量高于成年牛期。在增殖方面,人为的干扰和过表达DYNC1I2基因后,q PCR和Western Blot结果显示,干扰该基因后PCNA、CDK2与Cyclin E1的表达量被显著抑制,过表达能使其显著升高;CCK-8、Ed U结果显示,干扰基因后,细胞活性降低,细胞的增殖数减少,过表达的结果则与干扰结果相反。在分化方面,干扰该基因能够使Myo G基因的表达显著升高,过表达使Myo D和Myo G的表达水平有所减弱。综上所述,DYNC1I2基因能够促进细胞增殖分化。综上,阐明了DYNC1I2-CNV显著影响黄牛的部分生长性状,揭示了DYNC1I2基因影响成肌细胞增殖分化,该研究对黄牛生长发育提供新的目的基因,为探究遗传机制提供理论材料,可为肉牛育种提供重要的候选分子标记。
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