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目的观察不同浓度盐酸二甲双胍、顺铂及盐酸二甲双胍联合顺铂用药对体外人结肠癌HCT-8细胞增殖、凋亡状况的影响,探究二甲双胍、顺铂及联合用药影响人结肠癌HCT-8细胞凋亡的可能机制。方法体外常规37℃、双气、95%湿度环境无菌培养人结肠癌HCT-8细胞,取生长状态良好的HCT-8细胞行MTT实验,观察不同浓度盐酸二甲双胍及不同浓度顺铂药物作用下人结肠癌HCT-8细胞的增殖情况;根据药物剂量依赖性实验结果,将HCT-8细胞分成二甲双胍组(MET)、顺铂组(DDP)、二甲双胍联合顺铂组(MET+DDP)、空白对照组(CK)4个组群并给予对应处理;再依次行MTT实验检测MET、DDP、MET+DDP、CK各组细胞于相应处理24、48、72 h时的增殖情况;流式细胞术检测48 h时各组HCT-8细胞的凋亡情况;Western blotting实验观察各组HCT-8细胞经相应处理48 h时的凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax,凋亡启动蛋白Caspase-3(激活型)以及AKT/GSK-3β通路蛋白的表达水平;用SPSS Statistic17.0数据统计分析软件分析各实验数据,评估实验效果。结果1 MTT实验结果提示:盐酸二甲双胍与顺铂均可抑制体外HCT-8细胞的增殖,并存在一定的时间及剂量依赖性;MET、DDP两组的细胞增殖活性均明显低于CK组,且MET+DDP组的细胞增殖活性明显弱于其它三组(P<0.05)。2流式细胞术检测细胞凋亡状况提示:MET、DDP两组的细胞凋亡状况均明显强于CK组,且MET+DDP组的细胞凋亡情况较其它三组明显严重(P<0.05)。3 Western Blotting结果提示:MET+DDP组的Bax、Caspase-3(激活型)表达活性均明显高于MET、DDP、CK三组(P<0.05);MET+DDP组蛋白Bcl-2、P-AKT、P-GSK-3β表达活性均明显低于其它组群(P<0.05);细胞蛋白AKT、GSK-3β、GAPDH在MET+DDP、MET、DDP、CK四组中表达活性相对恒定(P>0.05)。结论二甲双胍、顺铂及二甲双胍联合顺铂用药时均可明显提高人结肠癌HCT-8细胞的凋亡,且二甲双胍及顺铂联合作用时促HCT-8细胞凋亡作用更明显;其促凋亡机制可能与AKT/GSK-3β/Bcl-2家族蛋白信号通路受调控有关,并且能促使p-Caspase-3转化为Caspase-3(激活型)启动细胞凋亡程序。另一方面,二甲双胍与顺铂联合用药的促进HCT-8细胞凋亡作用要强于单药作用。图20幅;表6个;参106篇。