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本文研究了COX-2特异性抑制剂(塞莱昔布)对人低分化鼻咽癌细胞系CNE-2Z运动、侵袭和转移能力的影响，初步探讨COX-2对鼻咽癌淋巴结侵袭和转移中的作用及其可能的机制。
[方法]采用免疫组织化学SP法检测26例鼻咽粘膜慢性炎、65例鼻咽癌组织和30例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中COX-2、CD44v6和E-cadherin的表达，分析COX-2和CD44v6、E-cadherin之间的相互关系。用药物塞莱昔布体外干预培养人低分化鼻咽癌细胞系CNE-2Z，以MTT及平板克隆形成实验观察塞莱昔布对CNE-2Z细胞活性的影响。用不同浓度的塞莱昔布处理培养后的CNE-2Z细胞，通过免疫细胞化学和RT-PCR检测COX-2、E-cadherin、CD44v6蛋白和基因的表达水平；通过细胞同质粘附实验、细胞分离实验、细胞—基质粘附实验、人工重组基底膜侵袭实验、细胞运动实验和过河实验等来检测COX-2对鼻咽癌CNE-2Z细胞系的同质和异质粘附性、侵袭和运动能力的改变和影响。
[结果]临床病理组织切片标本免疫组化结果显示：鼻咽粘膜慢性炎、鼻咽癌癌旁组织、癌组织和鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中COX-2的阳性表达率分别为：26.9％、54.5％6、61.5％和83.3％(P＜0.01)；CD44v6的阳性率分别为：15.4％、48.5％、50.8％和86.7％(P＜0.01)；E-cadherin阳性表达率分别为：100％、69.7％、53.8％和33.3％(P＜0.01)。Spearman等级相关分析，在鼻咽癌组织和鼻咽癌淋巴结转移灶中，COX-2与CD44v6的表达呈正相关(鼻咽癌：r=0.251，P＜0.05)(淋巴结转移灶：r=0.505，P＜0.01)；而在鼻咽癌组织和鼻咽癌淋巴结转移灶中，COX-2与E-cadherin的表达呈负相关(鼻咽癌：r=-0.260，P＜0.05)(淋巴结转移灶：r=-0.647，P＜0.01)。MTT检测细胞存活率结果显示不同浓度塞莱昔布可以不同程度地抑制CNE-2Z细胞增殖，表现出明显的量效和时效关系(P＜0.05)。细胞克隆形成率结果显示：0、25、50、75、100μmol/L塞莱昔布处理的CNE-2Z细胞克隆形成率分别为(85.68±1.83)％、(69.00±4.08)％、(59.03±2.43)％、(37.28±3.25)％、(12.58±3.69)％(P＜0.001)。免疫细胞化学结果：0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L塞莱昔布作用24h后，COX-2的强阳性率分别为(95.10±2.91)％、(78.15±3.18)％、(53.35±1.88)％(P＜0.001)，CD44v6的强阳性率分别为(93.75±2.50)％、(85.16±2.75)％、(79.67±1.84)％(P＜0.001)，E-cadherin的强阳性率分别为(21.73±2.64)％、(28.69±2.36)％、(40.33±1.27)％(P＜0.001)。说明随着药物浓度的增高，COX-2、CD44v6均有不同程度强阳性表达下降，而E-cadherin强阳表达则不同程度的升高。RT-PCR结果显示，与未加药对照组相比，加药组CNE-2Z细胞中COX-2、CD44v6蛋白表达明显降低，而E-cadherin表达则显著升高(P＜0.001)。肿瘤细胞同质粘附实验和脱落实验结果表明，随着药物浓度的增高，CNE-2Z细胞的同质粘附能力逐渐增强，愈发不容易脱落和分离(P＜0.001)。肿瘤细胞—基质粘附实验结果显示，肿瘤细胞在25μmol/L、50μmol/L的平均光密度值是(0.908±0.024)，(0.775±0.201)，与0μmol/L组(1.241±0.040)相比差异有明显统计学意义(P＜0.001)。重组人工基底膜侵袭实验结果显示，25μmol/L和50μmol/L组穿过PVPF膜的CNE-2Z细胞数为(185.33±8.74/片)、(144.00±8.19/片)，其抑制率分别为(29.65±5.37)％、(45.28±4.66)％，与对照组相比差异有显著性(P＜0.001)。肿瘤细胞运动实验结果显示，0μmol/L组穿过PVPF膜的CNE-2Z细胞数为(124.3±8.02/片)，而25μmol/L和50μmol/L组为(84.3±12.22/片)、(55.3±9.29/片),其抑制率分别是(36.14±9.34)％、(58.71±7.02)％，与对照组相比差异有显著性(P＜0.001)。肿瘤细胞过河时间结果显示：25μmol/L、50μmol/L组CNE-2Z细胞过河时间分别为(26.83±0.89)h、(37.59±1.35)h，明显多于0μmol/L组(20.50±1.53)h，差异有显著性(P＜0.001)。
[结论]
(1)在鼻咽癌和鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中存在COX-2和CD44v6的高表达，E-cadherin的低表达，COX-2和CD44v6呈正相关，而与E-cadherin呈负相关，提示COX-2有可能通过上调CD44v6的表达和诱导E-cadherin表达缺失来促进肿瘤的侵袭和转移。
(2)COX-2可以促进CNE-2Z细胞的生长与增殖，可以通过诱导CNE-2Z细胞中CD44v6的表达升高和下调E-cadherin的表达使到肿瘤细胞的接触性抑制丧失，促进CNE-2Z细胞与基底膜的异质粘附，增强CNE-2Z细胞的运动和侵袭能力。
(3)塞莱昔布可以特异地抑制CNE-2Z细胞中COX-2的表达，使到CD44v6的表达降低和E-cadherin表达升高。塞莱昔布可减弱CNE-2Z细胞的基质粘附能力和运动，侵袭能力。
(4)COX-2有可能作为判断鼻咽癌生物学行为和转移潜能的指标之一，成为鼻咽癌防治的一个新靶点和途径。