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碎米荠是全国普遍分布的野生植物,属于十字花科,又名菜子七、半边菜,为民间常用药物,然而对碎米荠的生理和基本的生化组成进行分析及其活性成分进行研究利用的还未见报道。将多糖与硒有机结合成的硒多糖不但把无机硒转化成了有机硒,其化学结构形成了特殊的硒氧键,也有别于普通多糖,不仅可以使癌细胞DNA合成受阻而抑制癌细胞的生长,而且可以通过提高相关酶的活性来拮抗重金属中毒和抗氧化活性的能力,其生物活性普遍高于多糖和硒,更易于为机体的吸收和利用,近两年有研究报道从人工富集硒的灵芝、螺旋藻、海藻等植物中提取的硒多糖有明显的免疫调节作用,但对天然植物中提取的硒多糖的功能研究目前未见报道。本文以湖北恩施富硒地带碎米荠为研究对象,利用生物大分子研究的最新技术和现代分离手段,对碎米荠硒多糖进行分离纯化,并进一步对其结构特征及生物活性进行研究,主要结果如下: 1 样品的确定及碎米荠根的生化组成研究 以湖北恩施地区多年生碎米荠为研究对象,对其根、茎、叶进行硒含量分析的基础上,选定碎米荠根作为实验样品。并对根的生化组成作了比较系统的分析,测定了水分、灰分、蛋白质、脂肪、类胡萝卜素、叶绿素和矿物元素的含量。 2 碎米荠硒多糖的提取、分离纯化和纯度鉴定 以碎米荠根为原料,采用水提、醇沉法制备出碎米荠硒多糖,并确定了适合硒多糖提取的最佳工艺,即浸提温度为75℃,浸提系数2次,浸提时间为2h,料液比为1:40,硒多糖的提取率43.35%,硒多糖中硒含量为1.965mg/kg。 利用DEAE-Cellulose-52离子交换层析,采用步进式洗脱模式成功的将碎米荠硒多糖进行sepHdexG-200葡聚糖凝胶柱层析,得到四种均一的硒多糖,SDS-PAGE电泳法鉴定其纯度。 3 碎米荠硒多糖的结构鉴定 采用紫外分光光度计、傅立叶红外、气相、氨基酸分析仪等方法测定了碎米荠硒多糖的分子结构、单糖组成和氨基酸组成分析。